生物化学实验..docVIP

生物化学实验讲义 化学工程与技术学院 基础部  实验一 酪蛋白的制备 一、目的 学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。 二、原理 ． 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。 三、器材 1 、离心机 2、．抽滤装置 3、精密pH试纸或酸度计 4、电炉 5、烧杯 6、温度计 ． 四、试剂与材料 1、牛奶 2500mL 2、95％乙醇 1200mL 3、无水乙醚 1200mL 4、0.2mol／L pH 4.7醋酸—醋酸钠缓冲液 3000mL 5、．乙醇—乙醚混合液 2000mL 五、操作 将100mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH 4.7的醋酸缓冲液100 mL。用精密pH试纸或酸度计调pH至4.7。将上述悬浮液冷