巢式msp检测砷剂诱导人多发性骨髓瘤u266细胞系p16基因去甲基化及转录.docVIP

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2017-01-29 发布于天津
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巢式msp检测砷剂诱导人多发性骨髓瘤u266细胞系p16基因去甲基化及转录.doc

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巢式检测砷剂诱导人多发性骨髓瘤细胞系基因去甲基化及转录摘要本研究探讨用高灵敏度的甲基化检测方法及克隆测序分析法检测三氧化二砷的去甲基化作用并对其可能的去甲基化作用机制进行分析采用巢式甲基特异性法克隆测序分析法检测作用前后细胞株基因甲基化状态应用检测甲基转移酶基因的表达以生长曲线法集落形成实验检测对骨髓瘤细胞生长和增殖的抑制作用利用流式细胞仪含量分析法探讨对多发性骨髓瘤细胞系周期的影响结果表明未处理组细胞基因组的胞嘧啶保持不变而经作用的细胞基因组的胞嘧啶均已变为胸腺嘧啶这说明细胞存在基因甲基化作用

巢式MSP检测砷剂诱导人多发性骨髓瘤U266细胞系p16基因去甲基化及转录【摘要】本研究探讨用高灵敏度的DNA甲基化检测方法及DNA克隆测序分析法检测三氧化二砷（As2O3）的去甲基化作用，并对其可能的去甲基化作用机制进行分析。采用巢式甲基特异性PCR法（nestedmethylation specific PCR， nMSP）、DNA克隆测序分析法检测As2O3作用前后U266细胞株p16基因甲基化状态，应用RTPCR检测p16、DNA甲基转移酶1（DNMT1）、DNMT3A、DNMT3B