ｍｒｓａｐｂｐ２ａ单克隆抗体乳胶凝集检测法的建立.docVIP

ＭＲＳＡＰＢＰ２ａ单克隆抗体乳胶凝集检测法的建立 【摘要】应用抗ＰＢＰ２ａ单克隆抗体，以化学交联法致敏羧化聚苯乙烯乳胶，建立快速检测ＭＲＳＡ-ＰＢＰ２ａ的乳胶凝集法。【方法】以辛酸-硫酸铵法纯化ＰＢＰ２ａ单克隆抗体，将纯化后单克隆抗体和羧化乳胶经碳化二亚胺（ＥＤＣ）共价偶联，并对偶联条件（偶联抗体浓度、乳胶浓度、偶联时间和偶联缓冲液）进行探索和优化，建立检测ＰＢＰ２ａ的乳胶凝集法。【结果】１４０ｍｇ／Ｌ的抗体浓度与１５ｇ／Ｌ的羧化聚苯乙烯乳胶，在ｐＨ５．８缓冲液中偶联８ｈ后有较好的凝集效果和偶联效率，所建立的乳胶凝集法敏感性和特异性良好。【结论】初步建立了检测ＰＢＰ２ａ的胶乳凝集法，为研制ＭＲＳＡ快速鉴定试剂盒奠定了良好的基础。 【关键词】耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 　　耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ，ＭＲＳＡ）是全球性引起医院内感染最重要的耐药致病菌之一［１，２］，对常用的包括甲氧西林在内的多种抗生素广泛耐药，其主要耐药机制是由于染色体ｍｅｃＡ基因［３］编码产生了对β-内酰胺类抗生素低亲和力的青霉素结合蛋白２ａ（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ２ａ，ＰＢＰ２ａ）所致，由于其所致感染病情复