鼻炎的动物模型国内研究进展.docVIP

鼻炎的动物模型国内研究进展 【摘要】 　　对于医学的研究发展来说，动物模型的建立是不可或缺的部分。本文综述了国内近十年来包括变应性鼻炎、萎缩性鼻炎和慢性鼻炎在内的鼻炎动物模型的研究进展，探讨其造模机制和理论依据，以供实验参考。 【关键词】 变应性鼻炎 萎缩性鼻炎 慢性鼻炎 动物模型 　　动物模型的建立对于医学的研究发展来说有重要意义，对于疾病的成因、病理变化以及治疗的研究都是以其为基础的，他是医学研究不可或缺的组成部分。因为试验动物和人类之间在生理学上没有本质差异，两者都是通过释放实质上相同的内分泌激素来控制他们内部的一系列胜负反应过程，都是从中枢神经系统和外周神经系统发出相似的化学传递介质，都是以相同的方式对感染或组织损伤起反应的; Wistar大鼠，雌雄各半，体重150～200g。将卵白蛋白0.3mg，辅以氢氧化铝30mg作佐剂，加生理盐水1ml形成混悬液，行腹腔注射，隔日1次，共7次，为基础致敏。再用0.5%卵白蛋白的生理盐水攻击双鼻腔，每侧0.05ml，每日1次，共7次。每次攻击后均观察30min，内容包括喷嚏、搔抓、流涕，记录评分标准参见文献[3]。按标准叠加法记总分，每只超过5分为模型成功。 　　1.2.2 肾阳虚型变应性鼻炎动物模型的建立 　　根据邱氏[5]试验，选用3～4月龄健康雄性花色豚鼠，体重300～400克，以卵清蛋白（OV）0.3mg，辅以氢氧化铝30mg作佐剂，加生理盐水1ml形成混悬液，行腹腔注射，隔日1次，共7次。腹腔注射完成后的第2天，行被动皮肤免疫反应（passive-cut aneous-anapliylasi s,PCA）试验，确定OVIgE抗体效价升高后，将OV（OV20mg＋0.9%NS 20ul）用微量加样器滴入双侧鼻腔，每侧10ul，每日一次，共7次。同时每日肌注醋酸强的松龙注射液剂量为50mg/kg体重，连续7天，第8天开始将剂量减为40mg/kg，连续7天，第15天将剂量减为30mg/kg，连续7天。 　　1.2.3 经鼻致敏 　　根据赵氏[6]试验取成年Hattley豚鼠，体重400～600g，以每侧鼻孔20nl卵白蛋白+0.5mgAI（OH）3胶+0.1ml生理盐水，每天2次，连续10天予豚鼠双鼻孔喷滴，每次喷滴前用4%利多卡因先喷鼻腔，以抑制鼻腔纤毛运动，延长过敏原在鼻腔停留时间。间隔5天后，以1%卵白蛋白生理盐水溶液，每侧鼻腔0.1～0.5ml激发，每3天激发一次，连续激发11次。 　　1.3 豚草花粉变应原致敏 　　根据余氏[7]实验，取清洁级近交系Strain2豚鼠，雌雄各半，鼠龄10周，体重350～450g，42只，每只豚鼠用豚草花粉变应原0.75ml与等量的佛氏完全佐剂（FCA）进行人工免疫接种。先采用变应原加佛氏完全佐剂于腹腔注射0.5ml，四肢皮下（腋下、腹股沟）各注射0.25ml共1.5ml。两周后改为豚草花粉变应原加佛氏不完全佐剂免疫，每周一次，连续两周，注射剂量、部位与首次相同。免疫后第四周行鼻腔过敏原激发，配置0.5%豚草花粉变应原生理盐水溶液，用加样器滴入致敏组豚鼠双侧鼻孔（每侧10ul），每日一次，连续5天。从鼻腔滴入变应原开始观察，记录评分标准参见文献[3]。 　　1.4 以甲苯——2，4二异氰酸脂（TDI）致敏 　　1.4.1 根据赵氏[3]试验方法，取豚鼠雌雄各半，体重250g～300g。10%TDI溶液滴入豚鼠鼻腔致敏，每次0.3ml，每日一次，连续7天，然后每2日一次，共4次，致敏时间共15天，从第一次给药开始观察，记录评分标准参见文献[3]。所致敏动物于用药第7日后得分均超过5分，表明动物模型制作成功。 　　1.4.2 根据张氏[8]试验方法取豚鼠雌雄各半，体重270g～330g。用小棉签点10%TDI涂双鼻腔，对照组用乙酸乙酯，每日1次，连续4天，休息2周后再每周2次激发，共5周。 　　2 萎缩性鼻炎 　　根据戚氏[9]造模方法，选用健康、雌性SD大鼠，月龄2～3月，体重250g～300g。动物麻醉后行双侧卵巢切除术。术前15d心脏穿刺采血2ml，术后15、30、45、60天分批断头处死，每次15只。动物处死后，立即断头取鼻粘膜，以10%福尔马林液固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜观察。双侧卵巢切除术后15天，鼻粘膜未发生明显的形态学改变。鼻粘膜的萎缩性改变发生于术后30天，与术后45天、60天鼻粘膜萎缩性改变一致。 　　3 慢性鼻炎 　　3.1 二氧化硫肺气虚慢性鼻炎模型的建立。根据熊氏试验[10]，取健康花斑豚鼠，体重350g～400g，雌雄各半。将豚鼠放入染毒箱染毒5分钟，1次/日。每7天休息1次，共30天，至23天在染毒同时开始