胃癌患者治疗前后外周血th1-th2状态与疗效关系的临床评价.docVIP

胃癌患者治疗前后外周血Th1/Th2状态与疗效关系的临床评价 ［摘要］ 目的 （1）观察胃癌患者化疗前和化疗后的患者外周血Th1/Th2状态。（2）研究胃癌患者外周血Th1/Th2状态与化疗效果的关系，在分子生物学上评价化疗在胃癌治疗中的作用机制。方法 选择胃癌患者58例分别在化疗前、化疗后临床疗效评价有效率（37例）和无效率（21例）阶段，抽取清晨静脉肝素抗凝血20 ml，分离得外周血单核细胞（PBMC），加1640液配成混悬液；培养72 h后，取上清液用ELISA法分别测定细胞因子IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ浓度水平。结果 （1）胃癌患者的PBMC上清液中均反映出IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ的浓度水平。（2）胃癌化疗后临床有效患者同化疗前和化疗后无效患者的Th1/Th2水平比较，Th1类细胞因子IL-2含量明显增高，Th2类细胞因子IL-4、IL-6含量明显降低，P值分别为lt;0.05和lt;0.01。（3）胃癌化疗前与化疗后无效患者Th1/Th2水平比较，二者无明显差异。结论 （1）胃癌患者化疗后有效时PBMC上清液Th1类细胞因子IL-2处于优势状态，而Th2类细胞因子IL-4和IL-6受到抑制，说明化疗可以使Th2向Th1逆转。（2）临床上化疗有效者与Th2向Th1逆转的免疫效应有着密切的关系。 　　［关键词］ 胃肿瘤；单核细胞；Th1/Th2；治疗结果 学者在对人体外周血中Th1/Th2的研究中，已经发现Th1与Th2在肿瘤的不同阶段，其表达水平有明显的变化，在临床上，我们观察了58例胃癌患者治疗前后的Th1/Th2水平，拟通过对胃癌患者体内Th1/Th2水平的监测，判断患者的临床预后。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　58例均系我院1999年2月~2004年5月期间收治的胃癌患者；其中男33例，女25例;年龄均在37~70岁之间，平均55岁;按照肿瘤TNM分期标准：Ⅱb期30例，Ⅲa期19例，Ⅲb期5例，Ⅳ期4例。 　　1.2 治疗方案 　　以上患者明确诊断后均进行根治性手术，在我科住院期间采取联合化疗，选择MMC+5-FU+VCR和CF+5-FU+DDP方案。 　　1.3 疗效评定标准 　　临床上参照WHO疗效评价标准分为有效和无效，其中有效包括完全缓解和部分缓解，无效包括稳定或无变化。 　　1.4 Th1/Th2测定方法 　　1.4.1 试剂 　　细胞培养液RPMI1640由美国GIBCO公司出品；IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ试剂盒由美国GIBCO公司出品；IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ试剂盒由美国Enzyme公司提供。 　　1.4.2 标本采集 　　清晨空腹抽取肝素抗凝血剂15 ml，肝素浓度59 u/ml，按常规分离出外周血单核细胞（PBMC），标本留取分别在化疗前和化疗后临床评判有效或者无效。 　　1.4.3 测定方法 　　均使用1640液配制成3×106/ml的细胞悬液，培养72 h后，分别吸取上清液入EP管内，用ELISA法分别检测IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ。 　　1.5 统计学方法 　　用方差分析进行数据统计处理。 　　2 结果 通过对58例胃癌患者外周血中PBMC悬液IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ浓度水平的测定，我们将化疗前与化疗后相比较发现，其中化疗后无效组与化疗前没有明显差异;而有效组IL-2浓度较化疗前和无效组有明显提高（Plt;0.05），说明化疗对胃癌患者IL-2有明显促分泌作用；而有效组IL-4和IL-6浓度较化疗前和无效组有明显降低，P值分别lt;0.05和lt;0.01（见表1和表2）；说明化疗对胃癌患者IL-4和IL-6有一定的抑制作用。表1 胃癌患者化疗前与化疗后临床有效组PBMC悬液中Th1/Th2细胞因子浓度比较 （略） 注：与化疗前比较，*Plt;0.05，**Plt;0.01表2 胃癌患者化疗后临床有效组与无效组PBMC悬液中Th1/Th2细胞因子浓度比较 （略） 注：与无效组比较，*Plt;0.05，**Plt;0.0 　　3 讨论 在研究小鼠CD4＋Th细胞克隆时发现了两种不同的细胞因子产生模式［1］：Th1细胞分泌IL-2、IFN-γ和TNF-β;Th2细胞分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10和IL-13。有文献报道［2］T细胞可以分为Th1和Th2两种亚群，并发现Th1和Th2是人体内Th细胞介导的连续效应反应的两种不同方向发展的形式。在Th1和Th2之间存在一种