脑膜炎奈瑟菌实验室检测操作规范..docVIP

附件7脑膜炎奈瑟菌实验室检测操作规范 一、脑膜炎奈瑟菌鉴定程序和标准 脑膜炎奈瑟菌细菌鉴定程序 脑膜炎奈瑟菌的鉴定通常是通过在CAP和BAP上生长物通过革兰染色镜检和生化反应检测以确定是否为脑膜炎奈瑟菌，在此基础上再通过脑膜炎奈瑟菌分群诊断血清进行血清分群。 图xx 脑膜炎奈瑟菌鉴定程序 脑膜炎奈瑟菌感染确诊实验室检测 疑似流脑病例具有以下实验室检测结果之一，即可确诊： 培养：自脑脊液或血液标本中分离到脑膜炎奈瑟菌。 乳胶凝集检测：采用乳胶凝集检测试剂盒，脑脊液标本乳胶凝集检测结果阳性，目前Bio-Rad乳胶凝集检测试剂盒能检测A群、B群、C群和W135/Y群脑膜炎奈瑟菌感染。 PCR检测：脑脊液标本或血液标本PCR扩增特异性脑膜炎奈瑟菌DNA片段阳性。 通过ctrA基因扩增，鉴定脑膜炎奈瑟菌，通过扩增orf-2、siaD(B)、siaD(C)、siaD(Y)、siaD（W135）等基因片段鉴别不同的血清群，或通过Real-time PCR检测出特异性基因片段阳性。 血清IgG抗体滴度4倍增高：恢复期血清抗体滴度较急性期4倍增高。 二、脑膜炎奈瑟菌标本接种培养 （一）脑脊液标本 1．脑脊液标本预处理 脑脊液标本送到实验室后，应立即离心，2000rpm，20min，用巴斯德吸管吸取上清，进行乳胶凝集实验检测抗原。离心后的沉淀进行剧烈振荡或充分混合。取1滴沉淀准