环境工程微物学实验指导.docVIP

实验一 光学显微镜的操作及细菌、放线菌和 蓝细菌个体形态的观察 ? Ⅰ、显微镜的使用 ? 一、实验原理 微生物学研究用的显微镜通常有低倍物镜(16mm，10′)高倍物镜(4mm，40-45′)和油镜(1.8mm，95-100′)三种。油镜常标有黑圈或红圈，它是三者中放大倍数最大的。 使用油镜时，油镜与其他物镜的不同是载玻片与接物镜之间，不是隔一层空气，而是隔一层油质，称为油浸系。这种油常选用香柏油，因香柏油的折射率n＝1.52，与玻璃基本相同。当光线通过载玻片后， 可直接通过香柏油进入物镜 而不发生折射。如果玻片与物镜之间的介质为空气，则称为干燥系；当光线通过玻片后，受到折射发生散射现象，进入物镜的光线显然减少，这样视野的照明度就减低了(图Ⅰ-1)。 利用油镜不但能增加照明度；更主要的是能增加数值口径。因为显微镜的放大效能由其数值孔径决定的。所谓数值孔径，即光线投射到物镜上的最大角度(称镜口角)的一半正弦，乘上玻片与物镜间介质折射率所得的乘积，可用下列公式表示： 式中 数值孔径的大小又是衡量一台显微镜分辨力强弱的依据；分辨力是指显微镜能辨别物体两点间最小距离的能力。 式中 l=光波波长 由上述可知若n值和α角越大则N·A越大或光波波长越短，则显微镜的分