武汉大学天然产物的提取大黄（参考）.ppt

按上述色谱条件测定,计算出样品中大黄素的百分含量,结果见表2,方差分析见表3。 结果分析 从表2 可以看出,影响试验因素的顺序为提取次数提取时间乙醇浓度,最优水平为A3B3C3。从表3 可以看出,提取次数对试验影响差异达到显著水平。 2. 大黄提取物(免加热工艺) 一种新型的免加热提取工艺既运用压力交变法,给沁泡药材的容器施加压力,强制植物细胞几何形状改变,改善细胞壁两侧的渗透压,溶出细胞内个成分,分离除去固相杂质,利用低温干燥空气热平衡法干燥,得到提取物.整个工艺中无热源介入,提取率高,大多有效成分含量较传统工艺高. 方法:生大黄提取液 将生大黄用冷水沁泡,沁液40度以下浓缩至1g生药/ml及2g生药/ml.. 熟大黄水提取液 将生大黄用料酒(1:1)闷软,蒸12h,在用冷水沁炮,沁液40度以下 浓缩至1g生药/ml及2g生药/ml,免加热工艺大黄水提取物混浊液:浓度为1g生药/ml 3.水提法:分别准确称去大黄粉4份,每份5g,加水蒸煮2次,每次2h,合并提取液,蒸干,于105度干燥3h,备用. 4.　超声提取法 超声萃取作用机理主要是超声力学产生的空化效应。空化效应存在于萃取液中的微气泡。微气泡在声场作用下振动, 声压达到一定值时, 气泡迅速增长, 然后突然闭合。在气泡闭合时产生激波, 造成很大压力, 将植物组织中细胞破裂, 以利于溶剂浸透到植物细胞内部, 使细胞中的 有效成分溶于溶剂中。超声提取法所用时间短, 对蒽类成分没有破坏作用. 超声提取法缩短了提取时间,增加了提取率　 5.超临界萃取法 超临界萃取是借助于处于超临界条件下的流体所具有的高溶解性, 使天然植物中的许多成分溶解在超临界流体中, 操作过程中采用降压的方法, 将溶解到超临界流体中的溶质“脱溶”, 从而达到分离的目的。超临界流体萃取由于投资高并涉及大量研究工作, 直到近十几年来才开始商业性开发, 更广泛的应用还在研究中。近来, 关于超临界萃取在天然植物中的应用报道越来越多这一技术对天然植物的提取方式产生了重大影响。 6.吸附脱附法提取分离大黄蒽醌甙成分 利用聚酰胺的吸附活性对大黄中蒽醌具有吸附性强、且在水和乙醇洗脱时有明显差别的特点,即:用聚酰胺吸附乙醇脱附法提取蒽醌甙类成分。 6.1　PAED 的工艺流程 PAED 的工艺流程示见图1 。取50g 原药大黄,经处理得到是大黄蒽醌甙乙醇液50mL ,在50°C 左右减压,蒸馏,浓缩得10mL浓缩液。 图1 　PEAD 流程图 6.2分级置换层析 将10mL PEAD 产品液注入层析柱,固定相为聚酰胺。依次以水,38. 2 %乙醇溶液61. 8 %乙醇溶液及无水乙醇作分级洗脱溶剂 进行置换层析,收集相应组分。 6.3　TLC 分析 自制硅胶层析板。层析液123 号的组成分别是乙醇2乙醚(1∶3) ;乙酸乙酯-乙醇-乙醚(1∶2∶6) 和丙三醇-乙醇-乙醚(1∶2∶20) 。 6.4提取率的计算 以1 ,2 ,5 ,82四羟基蒽醌为标准品,分光光度计测定大黄原汁总蒽醌甙的含量.把所获大黄原汁的蒽醌甙浓度C0 作参比(设其为100 %) ,通过计算所获产品的对大黄原汁中蒽醌甙的提取率D 来评价它们。提取率D 的计算公式为: D = C/ C0 ×100 % 其中C 为提取产物蒽醌甙浓度,C0 为原汁中蒽醌甙浓度,D 为该工艺蒽醌甙的提取率。 六：现状与发展趋势 近年来, 国内学者对传统中药大黄应用现代医学的实验研究与临床观察方法和手段进行了深入广泛的研究, 进一步探明了大黄许多与现代医学相关而原来未知的功效, 一：基础研究 1. 1　动物实验: 陈德昌等研究表明:大黄可抑制病理情况下肝细胞肿瘤坏死因子受体TN FR1 (P55) 和TN FR2 (P75)的基因表达, 并能降低血浆和肝组织内肿瘤坏死因子A(TN F A) 和白介素6( IL 6) 水平, 具有明显抗炎作用。 1. 2　临床试验: 1.便秘 以生大黄粉神阕穴贴敷,采用生大黄粉3~5g 2.痤疮 应用单味大黄5~10g，研粉吞下，因人而异 3烧伤 用复方大黄烧伤药膜治疗烧伤患者 4.脑出血 常规组给予西医常规治疗；大黄组在此基础上加用生熟大黄汤剂 5.退热: 风热之邪入里传于阳明，高热,虽经中西药治疗，体温仍不下降。用单味生大黄水煎至沸，取汁300ml，少量频频饮用。 6.肾脏病 采用口服大黄粉治疗慢性肾功能衰竭(CRF)3g/d,20d为一疗程，保护肾功能,延缓其恶化 7.胃肠疾病 在常规治疗的基础上加用生大黄粉敷脐大黄与莪术联合治疗胃病具有增强蠕动，祛瘀生新，护胃止血作用，再配合基本