总甲状腺素TT4测定SOP.doc

文件名称：总甲状腺素（TT4） 测定SOP 版次： （共 页） 文件编号： 批准者： 编写者： 审核者： 生效日期： 1.目的 规范总甲状腺素（TT4）测定程序，确保检测结果的准确性。 2.测定方法 两步法竞争性结合免疫酶分析法。 3. 测定原理 　两步法竞争性结合免疫酶分析法。血清中总甲状腺素与试剂中的ALP连结的甲状腺素竞争结合特异的抗甲状腺素抗体的结合位点，形成的抗原-抗体复合物与微粒子上的固相化捕获抗体结合，形成微粒子-鼠抗T4 McAb-（T4或T4-ALP）免疫复合物。经磁性分离，洗涤除去未结合的物质，加入化学发光底物Lumi-Phos 530发光剂，经碱性磷酸酶的作用产生光子，测量反应产生的光，光子的量与标本中总甲状腺素的浓度成反比，由多点校准曲线求得标本中甲状腺素的浓度。 4.性能参数 无须输入操作参数，仪器根据预设的分析项目参数和试剂条码的信息自动进行分析。标本量30 μL。 4.1 精密度：批内CV ＜4.5％；总CV ＜5 %。 4.2 分析范围：5～300μg/dl 。 4.3 灵敏度：5 μg/dl。 4.4 方法的有限性及干扰因素：胆红素10mg/L、TG 18 g/L、肝素、Hb 5 g/L在检测允许的精密度范围内对结果没有影响。 5.原始样本系统 5.1 总则：符合本室《检验标本采集手册》 5.2 常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。 5.3 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 5.4 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。 5.5 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 5.6 标本拒收标准 5.6.1 标本量过少。 5.6.2 检验申请单上姓名或条码与标本上姓名或条码不一致。 5.6.3 检验项目与标本类型不符，或抗凝剂不符。 5.6.4 标本送检时已放置时间过久。 5.6.5 输液时在同侧血管抽血。 5.6.6 标本严重容血或脂血。 5.6.7 无标本（空管） 5.6.8 条码包含信息不全（如无采样时间等）。 6.标本保存 6.1 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清, 避免溶血。 6.2 标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定48h。需较长时间保存应将血清存放于-20℃。冰冻标本仅可冻融一次。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均密闭保存。 6.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7d。 7.设备和试剂 7.1 设备： 美国Beckman Coulter公司 DXI 800免疫分析系统。 7.2 试剂： ACCESS专用TT4测定试剂盒，由美国Beckman Coulter公司出品，产品号33800。未打开的试剂包保存于2～8℃在效期内稳定，不可冻存。开启的试剂包载入系统中可使用28d。 7.3 试剂盒组分 7.3.1 磁性微粒子：包被了羊抗鼠IgG的磁性微粒子，含BSA的Tris缓冲液。 7.3.2 液体试剂：鼠抗甲状腺素单克隆抗体，Tris缓冲液。 7.3.3　甲状腺素-ALP结合物，Tris缓冲液。 7.3.4　试剂包即开即用，无须特殊准备。 7.4 其他试剂与用品 7.4.1 化学发光底物：ACCESS的通用发光剂底物液，Cat. No. 81906。 7.4.2 清洗缓冲液、反应杯等。 8.校准程序 8.1 校准品: 美国Beckman Coulter公司提供的TT4配套校准液需贮2～8℃。5个浓度。有校准卡片。 8.2 校准类型和校准点数目：非线性模式，6个校准点。 8.3 校准周期：在同一批号试剂的使用效期内校准曲线有效，但在间隔21d后需要重新校准。每当：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。 8.4 校准液重建方法：液体试剂，直接使用。 9.质量控制程序 9.1 质控品：美国Beckman Coulter公司提供配套的质控品。 9.2 质控液准备 9.2.1 小心打开瓶盖，避免内容物的任何损失。 9.2.2 在20～25℃的室温下，准确吸取5ml蒸流水复容1瓶质控血清。 9.2.3 盖上橡皮塞，拧紧瓶盖，使用前避光30分钟。 9.2.4 轻轻旋转，确保所有的冻干物完全溶解。 9.2.5 勿摇晃小瓶。 9.2.6 分装致离心管中，每管0.5ml -20℃保存。 9.3　质控品测定：在每一批标本中测定质控血清一次。 9.4 质控规则：采用L-J质控图，以±3s为失控限。标准差由本室实验数据得出。 9.