专题二细胞工程教程.ppt

卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 重组胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 多莉羊的培育过程 重组细胞 结论：动物体细胞核具全能性 1.过程： 诱导方式 物理法 化学法 生物法： 灭活的病毒 仙台病毒 紫外线 丧失感染性 （不感染细胞） 保留融合活性 （诱导细胞融合） 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 思考讨论： 为什么细胞融合过程 中使用的病毒需要 灭活？ 1970年，有两位科学家 做了一个著名的实验： 人—鼠细胞融合的实验， 以证明细胞膜上的蛋白 质分子是运动的。 人—鼠细胞是怎样实现融合的？动物细胞融合有什么实践意义呢？ 正在融合的 淋巴细胞与骨髓瘤细胞 正在融合的鸡血细胞 ⑶动物细胞融合的原理： 细胞膜的流动性 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤） （一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活 获得产生相应抗体的B细胞 （二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。 2.3单克隆抗体的应用 诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。 “生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物 单抗导向，药物为弹头 治疗疾病和运载药物 主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。 单克隆抗体 筛选 杂交细胞 杂交瘤细胞 体外或体内 细胞培养 筛选 骨髓瘤 细胞 诱导细胞融合 特异性杂交瘤细胞 杂交瘤细胞系 提取 经过免疫的 B淋巴细胞 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 单克隆抗体的制备过程： 特点：既能产生专一抗体又能大量繁殖 特点：特异性强灵敏度高可大量制备 注射抗原 免疫 项目 动物细胞融合 植物体细胞杂交 原理 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 融合前提 分散成单个细胞 去除细胞壁 诱导方法 聚乙二醇、离心、振动、电激、灭活病毒 聚乙二醇、离心、振动、电激、 结果 获得杂种细胞或细胞产物 获得杂种植株 用途 制备单克隆抗体 培育作物新品种 意义 使远缘杂交成为可能 克服远缘杂交障碍 动物细胞工程小结 动物细胞培养：原理、营养、条件、过程、细胞生长特点、结果、应用 动物细胞融合：原理、诱导方法、过程、应用 单克隆抗体的制备：原理、过程、特点、应用 核移植与克隆动物：供体、受体、核移植方法、克隆动物的方法、克隆动物的遗传特性、应用 动、植物细胞工程的比较：植物组培技术与动物细胞培养技术、植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术 1.怎样获得能够产生抗体的B淋巴细胞？ 2.骨髓瘤细胞具有什么特性？ 3.科学家期望杂交瘤细胞有怎样的性状？ 4.细胞融合有哪几种情况发生？怎样筛选出杂交瘤细胞？ 5.杂交瘤细胞在体外培养要用到那种细胞工程技术？  专题二 细胞工程 细胞工程的概念 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 细胞工程 植物细胞工程 动物细胞工程 植物细胞工程的基本技术和理论基础 植物细胞工程的理论基础是： 植物细胞的全能性 植物细胞工程常用的技术是 植物组织培养 植物体细胞杂交 1、定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 2、原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 3、差异： 4.植物细胞表达全能性的条件 (1)受精卵(最高)＞卵细胞(精子)＞体细胞； (2)植物体细胞＞动物体细胞； (3)胚胎干细胞＞其他干细胞＞体细胞。 一、细胞的全能性 (1)离体条件。 (2)无菌操作(防止杂菌污染)。 (3)种类齐全、比例