附录1-8（检测方法）.docVIP

附录1 动物性食品中金刚烷胺残留量的测定液相色谱-串联质谱法 范围 本标准规定了动物性食品中金刚烷胺残留量检测的制样和液相色谱－串联质谱测定方法。 本标准适用于猪、鸡和鸭的可食性组织（肌肉、肝脏和肾脏）及禽蛋中金刚烷胺残留量的检测。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 1.1-2009 标准工作导则第1部分：标准的结构和编写规则 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 原理 试样中残留的金刚烷胺用1%乙酸乙腈溶液提取，正己烷液液分配去脂，基质固相分散净化，液相色谱-串联质谱正离子模式测定，内标法定量。 试剂和材料 以下所用的试剂，除特别注明外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。 金刚烷胺标准品，含量≥98.0%。 D15-金刚烷胺标准品，含量≥99.0%。 甲醇：色谱纯。 乙腈：色谱纯。 正己烷：色谱纯。 冰乙酸。 甲酸：色谱纯。 无水硫酸钠。 1%乙酸乙腈溶液：取冰乙酸10 mL，用乙腈稀释至1000 mL。 50%乙腈水溶液：取50 mL乙腈，用水稀释至100 mL。 0.1%甲酸水溶液：取1 mL甲酸，用水稀释至1000 mL。 金刚烷胺、D15-金刚烷胺标准贮备液：分别精密称取10 mg金刚烷胺和D15-金刚烷胺标准品分别于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配制成浓度为1 mg/mL的金刚烷胺和D15-金刚烷胺标准贮备液，-20℃以下保存，有效期3个月。 金刚烷胺、D15-金刚烷胺标准工作液：分别精密量取1 mg/mL的金刚烷胺和D15-金刚烷胺标准贮备液0.1 mL，分别于100 mL容量瓶中用甲醇稀释至刻度，配制成金刚烷胺浓度为1 μg/mL，D15-金刚烷胺浓度为1 μg/mL的标准工作液，2(8℃保存，有效期2周。 净化吸附剂：PSA（乙二胺-Ｎ-丙基硅烷），粒度40 μm。 仪器和设备 5.1 液相色谱－串联质谱仪且配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2 天平：感量0.01 g。 5.3分析天平：感量0.00001 g。 5.4 均质机。 5.5 涡旋混合器。 5.6 旋转蒸发仪。 5.7离心机：转速3 000 r/min。 5.8高速离心机：转速10 000 r/min。 5.9氮吹仪。 5.10滤膜：0.22 μm。 5.11针式过滤器：内填有50mg的PSA净化吸附剂，滤膜孔径0.22 μm。 试料的制备与保存 试料的制备 取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。 取适量新鲜或冷藏的空白或供试禽蛋，去壳后混合均匀。 ((取匀浆后的供试样品，作为供试试料。 ((取匀浆后的空白样品，作为空白试料。 ((取匀浆后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。 试料的保存 -20℃以下保存。 测定步骤 提取 称取试料2.0 ( 0.05 g（精确至0.01g）于50 mL离心管中，加入D15-金刚烷胺标准工作液20 (l。然后加入1%乙酸乙腈溶液10mL，漩涡2 min，3000 r/min离心5min，上清液转入另一50 mL离心管中，重复提取一次，合并两次上清液，备用。 净化 备用液中加入无水硫酸钠3g，正己烷10 mL，涡旋1 min，3000 r/min离心5min，弃去正己烷层，剩余溶液转至100 mL鸡心瓶中，40℃水浴下旋转蒸干，用1.0 mL甲醇溶解残渣。（1）加入PSA50mg，涡旋30s，取上清液过滤膜至1.5 mL试管中；或者（2）直接匀速通过针式过滤器，呈滴状流入1.5 mL试管中。量取滤液0.5 mL于离心管中，40℃氮气吹干，加入50%乙腈水溶液0.5 mL，涡旋30s，10000 r/min离心5min，取上清液供上机测定。 标准曲线的制备 溶剂标准溶液：准确量取金刚烷胺和D15-金刚烷胺标准工作液适量，用50%乙腈水溶液稀释配制成金刚烷胺浓度为2、4、10、20、100、200 μg/L，D15-金刚烷胺浓度均为20μg/L的金刚烷胺系列标准溶液，供液相色谱-串联质谱测定。 基质匹配标准溶液：取空白猪肝和猪肾试料，除不加D15-金刚烷胺标准工作液外，均按上述方法处理分别制得其空白基质溶液，准确量取金刚烷胺和D15-金刚烷胺标准工作液适量，分别用猪肝和猪肾的空白基质溶液稀释，配制成金刚烷胺浓度为2、4、10、20、100、200 μg/L，D15-金刚烷胺浓度均为20μg/L的系列猪肝和猪肾基质匹配标准溶液，临用现配，供液相色谱-串联质谱测定。 测定 色谱条件 色谱柱：C18，150