水中大肠菌群快速检测方法酶底物孙宗科.docVIP

水中大肠菌群快速检测方法－酶底物法与多管发酵法的比较 《卫生研究》2006第3期 孙宗科 丁培 薛金荣 陈西平1 吴榕2 张雅婕3 张淑红4 遇晓杰5 中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所，北京 100021 摘要： 目的 比较酶底物法与多管发酵法用于水中大肠菌群的检测。 方法 应用加标试验和实际水样检测的方式，比较酶底物法与多管发酵法用于水中大肠菌群检测结果的一致性，以及假阳性率。 结果 酶底物法与多管发酵法用于水中大肠菌群检测结果具有一致性，假阳性率无统计学意义的差别。 结论 酶底物法可以用作评价水质微生物污染的标准方法。 关键词：大肠菌群 酶底物法 多管发酵法 快速检测 Comparison between rapid detection method of enzyme substrate technique and multiple-tube fermentation technique in water coliform bacteria detection Sun Zongke, Wu Rong, Chen Xiping, et al. Institute for Environment Hygiene and Health Related Product Safety, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 100021, China Abstract：In order to compare between rapid detection method of enzyme substrate technique and multiple-tube fermentation technique in water coliform bacteria detection, inoculated and real water samples are included in this experiment. Results demonstrate that enzyme substrate technique shows equivalence with multiple-tube fermentation technique. It is suggested that enzyme substrate technique can be used as a standard method for water microbiological safety evaluation. Key words：coliform bacteria, enzyme substrate technique, multiple-tube fermentation technique, rapid detection 目前我国对生活饮用水、水源水、地表水等进行卫生学评价，检测的指标为大肠菌群（coliform bacteria）和粪大肠菌群(faecal coliforms)，以这两种指标作为粪便污染的指示菌。采用的标准检测方法为膜过滤法（MF）和多管发酵法（MTF）。但这两种方法检测时间相对较长，需2～5天，需验证试验，试验步骤较为繁琐，不能对水的卫生学状况做出快速评价。因此，采用快速简便的检测方法十分必要。酶底物法可以较好的弥补传统方法的不足。 酶底物法（enzyme substrate technique）采用大肠菌群细菌能产生β-半乳糖苷酶（β-D-galactosidase）分解ONPG（Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside）使培养液呈黄色，以及大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide）使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理，来判断水样中是否含有大肠菌群及大肠埃希氏菌。酶底物法可以采用成品的培养基及试剂， 基金项目：GB/T 5750《生活饮用水标准检验方法》修订工作项目。 作者简介：孙宗科，男，实习研究员 责任作者：陈西平，男，研究员 1中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所，2 农业部食品质量监督检验测试中心（上海），3 北京市疾病预防控制中心，4 河北省疾病预防控制中心，5 黑龙江省疾病预防控制中心 操作方便；无需确认试验；酶底物法检测时间较短，18h-24h即可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌的MPN值。 由于酶底物法用于水样定量检测时采用最可能数（MPN，mo