土壤生态毒理风险评价中的陆生无脊椎生物标志物.docVIP

土壤生态毒理风险评价中的陆生无脊椎生物标志物 钱芸，刘广良，戴树桂 （南开大学环境科学与工程学院，天津 300071） 摘要：综述了目前土壤生态毒理风险评价中常用的陆生无脊椎生物标志物，并对一些新的生物标志物作了简介，对目前研究的不足及今后需加强领域提出了建议。 关键词：土壤；风险评价；生物标志物；无脊椎动物 中图分类号：X171.5 文献标识码：A 文章编号：1008-181X（2002）01-0070-05 作为早期预警系统或污染危害的准确测量的有效工具，生物标志物在生态毒理风险评价中得到了广泛的应用。广义上，生物标志物几乎包括所有的反映一个生物系统和潜在危害之间的相互作用的反应测量，这种危害可能是化学的，物理的，或生物的。狭义上，生物标志物指对于某一化学危害的可测量的指标。在生态毒理学文献中，生物标志物一词更进一步指暴露于污染物后生物体中分子的，生物化学的，生理学的，或细胞的改变，包括暴露生物标志物、效应生物标志物、易感性生物标志物三类。 近几年对于利用陆生无脊椎动物作为生物标志物评价化合物对土壤生态系统的负效应得到越来越多的重视。陆生无脊椎动物能提供有意义的靶是因为它们在维持土壤生态系统的功能中起着主要的作用，它们能加强土壤的结构并分解有机物质。无脊椎动物代表着土壤中所有动物种类的一个主要成分，并经常以高的种群密度存在，采样作分析后对种群动力学没有显着影响。并且，从伦理学和法律上考虑使用无脊椎动物也比使用脊椎动物合适。与生物标志物有关的是，土壤无脊椎动物具有直接与土壤孔隙水或食物暴露相接触的优越性，而不是象脊椎动物那样，通过食物链间接地暴露。 需要指出的是，使用存在于水生（主要是淡水）和陆生生物中的生物标志物时有根本的区别。水生生物标志物多用来在一个动荡环境中为毒性压力提供早期预警。而由于在土壤生态系统中毒性物质的半衰期相对较长（土壤经常作为污染物的汇），故暴露的持续时间也比较长，所以陆生生物标志物对于早期预警来说不是非常必要的。陆生生物标志物的价值在于其直接与土壤中污染物的生物可利用性分数相关，能为土壤的实际危害提供更准确的估计，而不仅仅是测量土壤隔室中总污染物的浓度。生物标志物反应可能是在半致死效应变得明显之前的对于化学压力敏感的指标，例如生长或繁殖的抑制。生物标志物的测定为低于个体水平的环境污染物的暴露和效应的早期评价提供了有力的工具。 1 常用的陆生无脊椎生物标志物 1.1 应激蛋白 应激蛋白最初是在果蝇中发现的，包括一系列具有不同分子质量的蛋白家族，长期以来被称为“热休克蛋白”（hsp）[1]。根据其分子质量，应激蛋白可被划分为不同的蛋白家族：不均一的低分子质量的应激蛋白，其分子质量约为15~40 kDa；线粒体或细胞质的应激-60（hsp60）蛋白（58~60 kDa）；重要的应激-70蛋白家族（hsp70, 66~78 kDa）；以及应激-90（hsp90，83~90 kDa）；高分子质量的应激蛋白（100~110 kDa）。在无脊椎动物中以上蛋白都存在[2]。此外，一种与非溶酶体蛋白降解有关的的小分子蛋白（7 kDa）——泛激素，以及另外一种与应激-60相关的约10 kDa的蛋白通常也被划入应激蛋白家族中。 暴露于多种化合物之后，都能发现应激蛋白的诱导。此类蛋白还对温度升高、损伤、病毒感染以及组织损害有反应[3]。虽然存在着明显的非特异性，应激蛋白作为暴露和效应生物标志物的适合性得到了越来越多的关注和讨论[4~6]。应激蛋白作为生物标志物的主要优势在于它们能将所有的负效应有效地综合并体现在蛋白的完整性上，这可概括为“蛋白毒性（proteotoxicity）”[2]。而另一方面，应激蛋白水平的普遍提高能指示应激物的存在，但无法提供应激物的化学性质方面的信息[4]。然而，上述应激蛋白家族成员中的许多种以应激物特异性的方式被调控，这便至少使区分应激物的类型成为可能[5]。 目前有关应激蛋白作为生物标志物的研究多数集中在脊椎动物，而对于无脊椎动物的应激蛋白作为生物标志物的研究只是在过去几年才得到越来越多的重视，并且是集中在对水生环境的研究上[2]。但目前对于陆生无脊椎动物中由毒物介导的应激蛋白表达的研究也在增加，并有望建立一套生物分析方法。 应激-70是应激蛋白家族中得到最充分研究的一类。使用应激蛋白作为生物标志物的生理学上的合理性即是基于应激-70家族的诱导模式。由于应激-70参与细胞内蛋白的折叠和膜位移[7]，它对应激蛋白家族在展开及半折叠的多肽链上的结合是必需的。竞争性地与多肽的结合将释放出一种新的与应激-70相关的蛋白，接着新蛋白以磷酸化的三聚物的形式结合到DNA上的热休克元素（hse）区域，从而使应激-70能够得到表达[1]。因此，当应激物导致细胞中的蛋白变性