方法学评价.ppt

绪 论 一、临床检验基础的现状和特点 古代:感官检查（如：尿液－中世纪） 17世纪:荷兰Leeuwenhoek发明显微镜 20世纪末以来:自然科学基础学科与医学基础学科结合－电脑化、自动化、微量化 最常用的临床检验，借助先进的检测技术，对来自离体的血液、尿液、粪便以及分泌物和排泄物等标本进行理学、化学、病原学和显微镜形态学的检查， 临床检验现代特征： 1．从手工 自动化、电脑化检测 2． （point of care test， POCT） 4. 检验方法标准化 如：1966年，成立国际血液学标准化委员会（International Committee for Standardization of hematology , ICSH，源自1963年欧洲血液学协会标准化委员会） 5．全面质量保证 人员和物质 检验分析前：标本的采集、储存和转运过程尤为重要。现认为，管理好这两个环节，可降低70%的检验差错率。 (1)标本采集原则－保持离体标本质和量的完整性 （2）避免非疾病因素的干扰 生理变异： 第一类：不能控制的生理变异－年龄和性别－对检验影响为长期效应 第二类：相对能控制的生理变异，如食物、药物、情绪、状态、体位和标本采集时间等，对检验的影响多为短期效应。 1）饮食因素：刚进食、禁食、饮酒、吸烟 2）药物因素：方式、浓度 二、临床检验基础的应用目的 1．为疾病诊断和鉴别诊断提供实验室检测客观依据 2.为疾病疗效监测和预后判断提供动态变化依据 3.为预防疾病提供检测依据 4.为科学研究提供医学检验基本数据、基本检验方法和操作技能。 三、学好临床基础检验的基本要求 1． 掌握检验基础理论 2．掌握检验实验技能 3．熟悉检验方法学评价 4．了解检验项目参考值 红细胞计数(RBC)参考值男性：(4.0～5.5)×1012/L女性：(3.5～5.0 )×10 12/L 5．熟悉检验项目临床意义 血液标本采集 血液标本采集和抗凝剂选择 全血：临床血液学检查：血细胞计数、分类 血浆：临床生化检查（内分泌激素测定等）；血栓与止血的检查 血清：除纤维蛋白原等凝血 因子外，其他成分与血浆 基本相同，多数临床化学和 临床免疫学检查。 一、采血方法 静脉采血法 (venipuncture for blood collection) 皮肤采血法(skin puncture for blood collection ) 真空采血法 (vacuum tube for blood collection，负压采血法)。定量、安全、转运方便.封闭式采血,无需容器转移，减少溶血。真空定量贮存试管适于不同的检验项目 真空采血容器色泽及应用范围 【方法学评价】 皮肤采血：易溶血、凝血和可能混入组织液，重复性差。 开放式采血：操作环节多、不规范，易污染。 封闭式采血：操作规范，安全性、重复性好。 【质量控制】 血标本采集是分析前质量控制重要环节。 1．患者 2．采血 静脉采血：止血带压迫时间宜小于1min 3．溶血 4．血标本处理原则 及时运送检测。 保存：温度和有效时间 5．实验结果分析 采样时：年龄、性别、饮食、药物、时间 二、抗凝剂选择 1. 乙二胺四乙酸（ ethylenediamine tetraacetic acid, EDTA ）盐 Na2C10H14O8N2+Ca2+→ aC10H12O8N2+2Na++2H+ 特点：对血细胞形态、血小板计数影响很小（但影响血小板聚集）。 根据国际血液学标准化委员会(ICSH ) 1993年文件建议，血细胞计数用EDTA-K2作抗凝剂（EDTA-K2-2H2O 1.5～2.2mg/ml血液）。 2．草酸盐（sodium oxalate）：对凝血V因子保护功能差，影响凝血酶原时间测定；草酸盐与凝血酶钙结合后形成的沉淀物，影响自动凝血仪的使用；高浓度钾或钠离子易使血细胞脱水皱缩，草酸铵使血细胞膨胀。 3．肝素(heparin) 加强抗凝血酶III（antithrombin III,AT-III）灭活丝氨酸蛋白酶的作用，从而阻止凝血酶形成，阻止血小板聚集等作用，抗凝力强。用量（15±2.5）U/ml血液。但常可引起白细胞聚集，并使血涂片在罗氏染色（Romanowskyˊs staining）时产生蓝色背景。 4．枸橼酸盐 枸橼酸钠(trisodium citrate)，能与血液中的钙离子结合形成螯合物，从而阻止血液凝固。 2Na3C6H5O7+2Ca2+ → 2CaC6H507-+6Na+ 抗凝力较弱。抗凝比例1∶9。多用于