实验13 生物化学鉴定供参习.docVIP

实验13 生物化学鉴定 返回目录 ??一、糖发酵试验 【原理】 各种细菌所含有的分解糖（苷、醇）的酶类不同，对糖（苷、醇）的分解能力各有差异。对某一种糖有的细菌不分解，有的分解后仅产酸，有的分解后既产酸又产气，据此可用以鉴别细菌。 【试剂与器材】 1.菌种?大肠埃希菌、伤寒沙门菌 2.培养基?葡萄糖和乳糖发酵管 【操作步骤】 将大肠埃希菌和伤寒沙门菌分别接种于葡萄糖、乳糖发酵管内，35℃培养18h～24h观察结果。 【结果】 观察结果时，首先确定细菌是否生长，若细菌生长则培养基混浊，然后再观察细菌对糖类分解的结果： ①不分解糖：培养基颜色与接种前相比无变化，记录时以“一”表示； ②分解糖只产酸不产气：培养基中的指示剂（溴甲酚紫）由紫色变为黄色，液体培养基中的倒管未发现气泡；若为半固体培养基，则培养基内未见气泡或琼脂断裂，记录时以“+”表示； ③分解糖既产酸又产气：除培养基中的指示剂颜色改变外，液体培养基中的倒管见有气泡；若为半固体培养基，则培养基内出现气泡或琼脂断裂，记录时以“⊕”表示。 本试验大肠埃希菌分解葡萄糖和乳糖产酸又产气“⊕”，伤寒沙门菌分解葡萄糖只产酸不产气“+”，不分解乳糖“-”。 【注意事项】 配制糖发酵管时内装的小倒管在接种细菌前应是无气泡存在的，否则不宜接种细菌。 【思考题】 糖发酵试验的原理及其结果判断。 二、甲基红试验