宫颈癌前病变中与p16INK4A蛋白表达的意义.docVIP

宫颈癌中p16INK4A蛋白表达的意义 杨胜利 陕西省渭南市妇幼医院 【摘要】　目的　检测宫颈癌组织中p16NK4A蛋白表达状况, 探讨p16NK4A蛋白与宫颈癌发生发展以及临床病理指标的关系。方法；采用免疫组化法检测宫颈鳞癌组织中40例, 宫颈上皮内瘤病变（CIN）30例，宫颈癌旁正常宫颈组织25例中的p16NK4A表达。结果　p16INK4A在宫颈上皮内瘤病变中阳性率86.6%，宫颈鳞癌组织中阳性率均呈100%表达。正常宫颈组织中为阴性。p16NK4A阳性反应为细胞核及细胞质呈棕黄色。结论；p16基因在宫颈癌组织中缺失和突变导致其表达降低,使p16抑癌功能丧失, 特别是在DNA没有被修复前过早进入Ｓ期,造成宫颈上皮细胞异常增殖和分化失控,使宫颈上皮内瘤病变细胞阳性逐渐增多。导致p16INK4A在子宫颈癌上皮组织全层表达。所以p16INK4A 作为一种免疫组织化学标志物，应用于宫颈癌及其上皮内瘤病变（CIN）的诊断是很有应用前景的。 【关键词】　宫颈鳞癌；p16NK4A蛋白；免疫组化 宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤。严重威胁着妇女的健康和生命，尤其是年轻妇女的宫颈癌的患病率逐年上升的趋势。许多研究表明[1、2], 认为宫颈癌变与高危型人类乳头瘤病毒的持续感染密切相关。p16NK4A基因产物是细胞周期素依赖性激酶抑制物,参与了HPV感染引起的宫颈病变持续性发展。通过免疫组化法p16NK4A蛋白在宫颈癌及其宫颈癌旁正常宫颈组织的表达,以探讨它们与宫颈癌发生发展的关系。 材料与方法 1 材料:收集本院及渭南市中心医院2005年1月～2008年12月的宫颈标本，宫颈鳞癌40例, 宫颈上皮内瘤（CIN）30例，宫颈癌旁正常宫颈组织25例, 病理分期按WHO(2003)女性生殖系统肿瘤分类标准进行。患者年龄在25～67岁, 中位年龄为41岁。 2 方法: 免疫组化染色采用常规枸橼酸缓冲液-微波抗原修复-SP法，p16NK4A鼠抗人单克隆抗体为美国Santa Cruz公司产品，购自北京中杉金桥生物技术有限公司,实验操作严格按照试剂说明书进行。 3 结果判定: p16NK4A以细胞核和(或)细胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性细胞。以每个高倍视野下阳性染色的癌细胞数5%为阴性(-),6%～25%为弱阳性(+),26%～50%为明显阳性(++),50%为强阳性(+++ )。 4统计学分析 用SPSS1310软件包分析数据,用V2检验。 结　　果 表1　 p16NK4A在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变、宫颈鳞癌组织中表达 表 达 程 度 病变类型 总例数--------------------------------------------------------------------------------------------------阳性率 - + ++ +++ (%) ——————————————————————————————————————— 正常宫颈组织 25 25 0 0 0 0 宫颈上皮内瘤变 30 4 4 8 14 86.6 宫颈鳞癌组织 40 0 2 9 29 　 100 —————————————————————————————————————— 3　讨论 p16基因定位于人染色体9p21区，所编码的p16蛋白有132个氨基酸残基组成，分子量为13.9kDa。其产物p16INK4A蛋白可与cycinD1竞争性结合细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4），特异性地抑制CDK4活性, 当p16INK4A基因发生突变时,致使细胞过度增殖,特别是在DNA没有被修复前过早进入Ｓ期。造成宫颈上皮细胞异常增殖和分化失控,在宫颈癌前病变组织中均存在p16INK4A蛋白异常表达。其失活机制以纯合子缺失或异常甲基化为主。 宫颈癌的发生与HPV感染密切相关[2,3] ,p16INK4A与pRb之间存在负反馈调节,即pRb限制p16INK4A产物在细胞内浓缩,而HPV E7蛋白使pRb失活,使其对p16INK4A的负反馈调节作用丧失,从而,导致p16INK4A在宫颈癌前病变和宫颈癌中过度表达。本实验中, p16INK4A在宫颈上皮内瘤中阳性率86.6%，宫颈鳞癌、原位癌组织中阳性率均呈100%表达。正常组