细胞思考题2105粗制版.docVIP

定量检测几十万个分散的细胞的DNA含量 应用流式细胞检测技术（FCM） 1．.收集单细胞悬液(1 ×106个)，缓慢加入1 ml预冷的70％乙醇，于4℃固定过夜，或-20℃长期固定。 2．离心收集细胞，再以1ml PBS彻底洗去乙醇； 3．去上清后加入染色液(包含50ug/ml PI，100ug/ml RNase A，0.2% Triton X-100)，37 ℃ 染色30min后上机检测。 4．DNA荧光染料能与DNA结合，DNA含量的多少与荧光染料的结合量成正比，荧光强度反应了DNA吸收荧光分子的多少。通过流式检测就能反映细胞内DNA的含量。 看线粒体内外膜结构以及此处的某种蛋白颗粒 看线粒体内外膜结构及蛋白颗粒要用透射电镜。 定量检测一批光镜切片上含有某种蛋白质的细胞的数目 首先对切片上的全部细胞进行针对目的蛋白的荧光探针特异性标记（荧光染色，荧光标记抗体，外源导入荧光蛋白），同时对细胞行核复染。再以荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜观察。 荧光探针的特异性标记：即荧光强度与特异性标记蛋白的表达量成正相关 了解细胞发生死亡时的形态学和某个酶的改变 首选以流式细胞术通过对检测细胞以 Annexin V/PI双染法或亚二倍体(Sub-G1)峰的检测分选出凋亡细胞。 再荧光标记凋亡细胞的要检查的酶，以激光扫描共聚焦显微镜观察酶的变化。 对细胞电子染色后以扫描电子显微镜观察其形态。 了