11DNA重组技术的基本工具.pptVIP

布雷斯塔警长 鹰的眼睛,狼的耳朵,豹的速度,熊的力量 1.1DNA重组质技术的基本工具 专题一：基因工程 ATP的水解过程 三、核酸的分子结构 2、基本单位：核苷酸 两种核苷酸比较 核酸中共有多少种碱基？ 磷酸二酯键 下列四个DNA分子片段，可能是同一种限制性内切酶切割产生的黏性末端的一组是A．①② B．②③ C．③④ D．②④ 练习 4、在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 5、基因工程常用的受体细胞有（ ） (1)大肠杆菌 （2）枯草杆菌 （3）支原体 （4）动植物细胞 A. （3）（4） B. （1）（2）（4） C. （2）（3）（4） D. （1）（2）（3） 2和7能连接形成…ACGT… ????????????? …TGCA…； 4和8能连接形成…GAATTC… ???????????? …CTTAAG…； 3和6能连接形成…GCGC… ???????????? …CGCG…； 1和5能连接形成…CTGCAG… ???????????? …GACGTC…。 DNA连接酶 DNA聚合酶 连接DNA链 双链 单链 连接部位 在两DNA片段之间形成磷酸二酯键，不需模板。 将单个核苷酸形成磷酸二酯键连接起来,需模板。 DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？ 三、基因进入受体细胞的载体 —“分子运输车” 常用的运载体主要有两类： 1）细菌细胞质的质粒 2）噬菌体或某些动植物病毒 运载体条件： 1.能够在宿主细胞内复制并稳定保存； 2.具有多个限制酶切点以便与外源基因相连； 3.具有标记基因，如抗四环素的抗性基因。便于进行鉴定和筛选． 4.对受体细胞无害，容易分离，大小合适 能带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 标记基因的作用鉴别受体细胞中是否含目的基因。如将来可用含青霉素的培养基鉴别，将含目的基因的细胞筛选出来。 运载体的作用: 一：将外源基因转移到受体细胞中。 二：利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行复制。 噬菌体侵染细菌的动态过程： 侵入别的细菌 注入DNA 合成 吸附 组装 释放 吸附 侵入 合成 组装 释放 吸附 侵入 合成 组装 释放 吸附 侵入 合成 组装 释放 1.以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间形成氢键 C 练习 2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 练习 D 3.有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体 B D 练习 6、 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达 C 练习 教材P7思考与探究 1 2. 生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵 。 * * * * 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状. 回顾：什么叫基因工程？ 原理 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水