14第8章(34节).ppt

8.3 吸光光度法的灵敏度与准确度 8.3.1 灵敏度的表示方法 2. Sandell(桑德尔)灵敏度 (S) 定义：截面积为1cm2的液层在一定波长或波段处，测得吸光度为0.001时所含物质的量。 用S表示，单位：?g·cm-2 A= ? bc=0.001 bc ＝0.001/ ? 例1 邻二氮菲光度法测铁?(Fe)=1.0mg/L,  b=2cm , A=0.38 计算? 、S 和 解： c(Fe)=1.0 mg/L=1.0×10-3/55.85 =1.8×10-5(mol·L-1) c =1.0mg/L=1.0×10-3 g /1000mL = 1.0×10-4 g/100mL 例2 比较用以下两种方法测Fe的灵敏度. B. 用4,7-二苯基邻二氮菲光度法测定铁 ε533＝2.2×104 L·mol-1·cm-1 S = 55.85/(2.2×104)＝0.0025 (?g·cm-2) 8.3.2 准确度—仪器测量误差 由于T 与浓度c 不是线性关系，故不同浓度时的仪器读数误差?T 引起的测量误差? c/c不同。 测量误差公式推导: dA = d(-lgT) = d(-0.434lnT) = - 0.434dT/T 8.4.1 显色剂与显色反应 有机显色剂 显色反应的选择 灵敏度高，一般ε10 4; 选择性好; 显色剂在测定波长处无明显吸收, 对照性好, ? ?max 60 nm; 反应生成的有色化合物组成恒定，稳定; 显色条件易于控制，重现性好. 8.4.2 显色条件的确定 2. 显色反应酸度（c(M)、 c(R)一定） 邻二氮菲－亚铁反应完全度与pH的关系 8.4.3 测定中的干扰以及消除方法 2. 物理法—选择适当的测定波长 --选择适当的参比溶液 1. 仅络合物有吸收，溶剂作参比。 如 phen—Fe2+ 标准曲线 2.待测液也有吸收，被测液作参比。 如 测汽水中的 Fe 3. 显色剂或其他试剂也有吸收，空白溶液作参比 例:邻二氮菲光度法测Li2CO3中的 Fe， 参比溶液为不含Li2CO3样品的所有试剂。 4. 干扰组分与显色剂有反应,又无法掩蔽消除时： 1）掩蔽被测组分，再加入显色剂，作参比. 2）加入等量干扰组分到空白溶液中,作参比. 8.5 吸光光度法的应用 8.5.1 单一组分的测定 3. 蛋白质测定—溴甲酚绿、考马司亮蓝等 4. 氨基酸测定—茚三酮(紫色化合物) 5. 水质检测: NH4+、NO2-、Mn2+、Fe2+、SO42-、Hg2+---- 6. 药物含量测定—比吸光系数定量；荷移光谱法测定. 7. 紫外吸收(UV): NO2-、NO3-、SO42-、SO32-、CO32-、SCN-、酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋白质等。 8.5.2 多组分的测定 8.5.3 光度滴定 典型的光度滴定曲线 8.5.4 络合物组成的测定 1:1 8.5.5 一元弱酸离解常数的测定 MO吸收曲线 8.6.1 有机化合物分子的电子跃迁和吸收带 8.6 紫外可见分光光度法在有机定性分析中的应用 n→?* 跃迁（带孤对电子的杂原子与其他?键共轭） π→π* 跃迁（不饱和烃类) 电荷迁移跃迁（荷移光谱） 特点：谱带宽,吸收强度大,λmax处的ε可大于104 。 8.6.2 有机分子中的生色团与助色团 严格地说，只有含有不饱和基团或孤对电子的基团，才是生色团（ n→π*， π→π*） 生色团举例-1 生色团举例-2 生色团举例-3 不饱和基团助色效应大 反助色团 大多是吸电子基团（蓝移）? －NH3＋－SO2NH2－COO－－CN －COOH－COOCH3 －COCH3 －CHO 共轭烯烃键数与能量的关系 苯吸收带（溶剂：异辛烷） 苯环共轭的影响 苯的同系物的吸收光谱 苯环取代基的影响 羰基化合物 8.6.3 溶剂极性对吸收光谱的影响 溶剂极性增大， n ? ?* 吸收蓝移 溶剂极性影响的结论: 1. 非极性溶剂可见精细结构; 2. pH影响分子构型, 因此影响物质对光的吸收. 3. 利用溶剂效应可区别 ? ? ?*(红移) 还是 n ? ?*(蓝移); 4. 比较光谱时, 溶剂要相同. 常用溶剂的光学透明区 习 题 8.5 8.7 8.8 8.9 8.11 365 258 CH3I 900 227 (CH3)3N 200 204 CH3Br 100 220 (C