酶工程评分标及准标准答案.docVIP

华中科技大学武昌分校课程考试评分标准及标准答案 2009--2010 学年第二学期 课程名称： 课程编码： 课程类别： 考试专业班级：生物工程0701-02 考试日期： 评分标准及标准答案： 酶工程 A卷 一 名词解释： 1 酶工程：酶的生产与应用技术过程，包括化学酶工程和生物酶工程。 2 酶的诱导：由于加进某种物质，使酶的生物合成开始或者加速进行的现象，称为酶的生物合成的诱导作用。 3 酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的催化特性的技术过程。 4 固定化酶：指借助于物理或化学方法，将酶固定在载体上，并在一定的空间内进行催化反应的酶。 5 酶的非水相催化：酶在非水介质中进行的催化作用。 6 DNA改组技术：又称有性PCR，它依赖PCR技术，是基因在分子水平上进行有性重组，通过改变单个基因原有的核苷酸序列，创造新基因，并赋予表达产物以新功能。 7 酶反应器：用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。 8 酶学诊断：通过酶的催化作用测定体内某些物质的变化，或者通过体内原有酶活力的变化情况进行疾病诊断的方法。 二 填空题 1氧化-还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、连接酶 2 酶量、酶纯度、酶催化效率 3 延续合成型、滞后合成型 4 功能性蛋白 5 化学法、酶促法 6 越强，越大 7 人工随机突变、定向选择 三 选择题 D、C、C、A、D 四 简答题 1简述酶催化作用的机理。 要点：A 酶催化作用的实质在于它能降低反应的活化能。（1分） B 酶降低活化能的方式是通过形成中间复合物。（1分） C 酶的催化作用是具有专一性的，因此提出了“钥匙和锁”模型以及“诱导契合”模型。（1分） D 靠近定向；底物分子变形和诱导契合；酸碱催化；共价催化；微环境的影响等这些都是酶具有高效催化作用的机理（3分） 2简述乳糖操纵子模型 要点：A 操纵子的结构：调节基因、启动子、操纵基因、结构基因。（1分） B 乳糖操纵子的实验现象。（2分） C 乳糖操纵子在无诱导物和存在诱导物时不同的表达状况。（3分） 3何谓膜分离技术？在酶的生产中有何应用？ 要点： A 借助于一定孔径的高分子薄膜，将不同大小、不同形状和不同特性的物质颗粒或分子进行分离的技术成为膜分离技术（2分） B 应用（4分） 类别 截留颗粒大小 截留的主要物质 粗滤 2μm 酵母、霉菌、动物细胞、植物细胞、固形物等 微滤 0.2～2μm 细菌、灰尘等 超滤 20?～0.2μm 病毒、生物大分子等 反渗透 20? 生物小分子、盐、离子 4何谓金属离子置换修饰？简述其主要修饰过程和作用 要点：A 把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子，使酶的特性和功能发生改变的修饰方法称为金属离子置换修饰。(2分) B 酶的分离纯化：a首先将欲进行修饰的酶经过分离纯化，除去杂质，获得具有一定纯度的酶液。 b. 除去原有的金属离子：在经过纯化的酶液中加入一定量的金属螯合剂，如乙二胺四乙酸（EDTA）等，使酶分子中的金属离子与EDTA等形成螯合物。通过透析、超滤、分子筛层析等方法，将EDTA-金属螯合物从酶液中除去。此时，酶往往成为无活性状态。c加入置换离子：于去离子的酶液中加入一定量的另一种金属离子，酶蛋白与新加入的金属离子结合，除去多余的置换离子，就可以得到经过金属离子置换后的酶。（2分） C若从酶分子中除去其所含的金属离子，酶往往会丧失其催化活性。如果重新加入原有的金属离子，酶的催化活性可以恢复或者部分恢复。若用另一种金属离子进行置换，则可使酶呈现出不同的特性。有的可以使酶的活性降低甚至丧失，有的却可以使酶的活力提高或者增加酶的稳定性。（2分） 5简述常用的固定化方法及其应用范围 要点：A 吸附法：利用各种固体吸附剂将酶或细胞吸附在其表面上，而使酶或者细胞固定的方法。常用吸附剂有活性炭、硅藻土、多空陶瓷、硅胶等。吸附法操作简便，条件温和，单结合力较弱容易脱落。（1分） B 包埋法：将酶或含酶菌体包埋在各种多孔载体中，使酶固定化的方法称为包埋法。包埋法分为网格型和微囊型。常用包埋剂为琼脂凝胶、明胶、聚丙烯酰胺凝胶等。（1分） C结合法：通过离子键或共价键使酶与载体结合的固定化方法。离子键法常用DEAE-纤维素等条件温和，结合力较弱。共价键法常用载体纤维素，琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等。此法结合牢固，但操作复杂，有可能影响酶活。而且必须首先激活载体。（2分） D 交联法：借助双功能试剂使酶分子之间发生