广东省东莞市南开实验学校高考生物二轮复习 专题九 现代生物技术专题讲解练.docVIP

广东省东莞市南开实验学校2014届高考生物二轮复习 专题九 现代生物技术专题讲解练 　 考纲要求 三年考情 命题趋势 1.基因工程的诞生Ⅰ 2.基因工程的原理及技术Ⅱ 3.基因工程的应用Ⅱ 4.蛋白质工程Ⅰ 2013全国大纲、广东、江苏、安徽、四川、福建、全国Ⅰ 2012全国新课标、山东、江苏、福建、天津、浙江、安徽 2011浙江、海南、山东、江苏、安徽、福建、北京 1.趋势分析：(1)多以最新基因工程研究成果为载体，考查基因工程的工具与操作程序。 (2)以工农业生产、畜牧业生产和医学实践中的具体事例为命题背景，考查植物组织培养相关知识。 2.备考指南：(1)表解比较法理解限制酶、DNA连接酶和载体的作用。 (2)实例分析法理解基因工程的原理与过程。 (3)列表比较法理解两个不同：植物组织培养和动物细胞培养的不同、植物体细胞杂交与动物细胞融合的不同。 (4)图解法理解单克隆抗体的制备过程。 植物的组织培养Ⅱ 2013重庆、全国大纲、全国Ⅱ、天津　2012浙江　2011江苏 1.动物的细胞培养与体细胞克隆Ⅰ 2.细胞融合与单克隆抗体Ⅱ 2013重庆、全国大纲、山东 2012山东、福建、安徽 2011江苏、安徽 , 1．基因工程和克隆技术涉及哪些工具酶？ 2．转基因动物的培育涉及到哪些生物工程？ 考点一　基因工程 图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是(　　) A．图甲中的质粒用BamH Ⅰ切割后，含有4个游离的磷酸基团 B．在构建重组质粒时，可用Pst Ⅰ和BamH Ⅰ切割质粒和外源DNA C．用Pst Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒 D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长 [自主尝试]　________ 【链接提升】 1．限制酶切割时的注意事项 (1)注意切割的序列是否会连接成环：切割图1中的目的基因时，最好不要只用BamH Ⅰ，因为只用BamH Ⅰ切割时，目的基因的两端具有相同的黏性末端，易自行连接成环，因此最好同时用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ切割。 (2)限制酶的切割序列具有包含关系：图2中BamH Ⅰ和Mbo Ⅰ识别的碱基序列和酶切位点分别是G↓GATCC、↓GATC，这两个限制酶都可切割同一碱基序列GGATCC。 (3)切割时注意是否破坏所有抗性基因，导致缺乏标记基因。 2．基因工程的操作步骤 (1)目的基因的获取 (2)基因表达载体的构建： ①组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因。 ②构建过程： (3)将目的基因导入受体细胞 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞法(用Ca2＋处理) 受体细胞 受精卵、体细胞 受精卵 原核细胞 (4)目的基因的检测与鉴定： 跟踪训练　某质粒上有Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。 (1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来源属于________________________________________________________________________。 (2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能________，也不能________。 (3)在构建重组质粒时，应选用________和________两种酶对____________和____________进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。 (4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。 培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______________、______________。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是________菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________________作探针进行分子杂交检测，又要用______________________________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。 (5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用________________技术，愈伤组织经______________进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中