克隆技术--李皓.pptVIP

制作人:李皓 一、植物的组织培养 1、概念：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、原理：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有全能性的特点。 二、动物的细胞培养与体细胞克隆 1、动物的细胞培养 动物细胞培养概念： 动物细胞培养：就是从动物机体中取出相关的组 织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养 基中，让这些细胞生长和增殖。 动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养（糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清等） 3、温度和PH值（温度为36~37, PH为7.2－7.4） 4、气体环境（氧气和二氧化碳，氧气是细胞代谢所必需的，二氧化碳的主要作用是维持培养液的PH） 动物细胞培养技术的应用 大规模的生产有重要价值的生物制品 为基因工程提供受体细胞 检测有毒物质，判断毒性 用于生理、病理、药理等方面的研究 2、体细胞克隆 高度分化的植物组织仍保持着全能性，但动物细胞与植物细胞不同，动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程序的提高而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。因此，目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，用动物体细胞克隆的动物，实际是通过核移植来实现的。 三、细胞融合与单克隆抗体 1、细胞融合技术 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法也类似，常用的诱导因素有聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等。 动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 2、单克隆抗体 原始获得抗体的方法：向动物体内反复注射 某种抗原，使动物产生抗体，然后，从动物 血清中分离所需抗体。 （缺点：产量低、纯度低、特异性差） 谢谢观赏！！！！ * * 克隆技术 细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合技术科学。 植物细胞工程 右图是科学家用菊花的花瓣培育出的菊花，为什么用花瓣就能培育出一棵完整的植株呢？ 植物细胞具有全能性 植物细胞的全能性 具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有全能性的特点。 植物组织培养技术 植物组织培养技术的流程简图： 植物材料消毒 接种到诱导培养基 诱导出愈伤组织 愈伤组织转接到继代培养基上 可以不继代培养直接诱导分化 得到大量的愈伤组织 愈伤组织接种到分化培养基上 分化出幼苗 幼苗接种到生根培养基上 若诱导出幼苗的同时也实现生根，可以省略生根培养基 完整植株 移栽到大田 体细胞杂交技术 １、要想让两个来自不同植物的体细胞融合在一起，遇到的第一个障碍什么，如何处理？ 2、如果两个来源不同的原生质体发生融合形成了杂种细胞，下一步该做如何处理？ 关键之一：用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 关键之二：原生质体的融合 诱导细胞融合的方法 物理法 化学法 离心法 振动法 电激法 ——聚乙二醇（PEG） 植物体细胞杂交技术 将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 为什么“番茄-马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样，地上长番茄，地下结马铃薯？ 生物基因的表达不是孤立的，基因之间是互相调控，互相影响的，虽然此杂种中包含两个物种的全部遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能像原来那样有序表达。 去壁 去壁 纤维素酶果胶酶 原生质体 植物细胞 原生质体融合 离心、振动、电刺激、聚乙二醇 再生细胞壁 杂种细胞 去分化 愈伤组织 杂种植株 激素 筛选 等量 激素 再分化 植物体细胞杂交过程示意图 2009年考试说明中没有杂交内容 植物细胞工程的应用 一、植物繁殖的新途径 １、微型繁殖 利用植物组织培育技术来达到快速繁殖优良品种的目的 该项技术有哪些优点？ 繁殖速度快、高效 保持种的遗传特性 不受生长季节的限制 ２、作物脱毒 植物分生区附近（如茎尖）病毒极少，甚至无病毒 ３.人工种子： 以植物组织培养获得的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。 人工种子有哪些优点？ 保持遗传特性 不受季节限制 易于储藏和运输 二、作物新品种的培育 单倍体育种： 突变体的利用： 植物体细胞杂交育种 优点：明显缩短育种年限 育种原理：染色体变异 优点：克服远缘杂交不亲和障碍 育