《生理科学实验作业范本》HMOX1对巨细胞病毒感染小鼠肝癌进程的影响机制研究-背景.docVIP

HMOX1对巨细胞病毒感染小鼠肝癌进程的影响机制研究 血红素加氧酶(Heme Oxygenase)是体内血红素代谢的限速酶，从血红素α-亚甲基桥处开环以生成胆绿素，胆绿素再在胆绿素还原酶作用下转变为胆红素[1]。体内血红素加氧酶有三种同工酶，分别为HO-1，HO-2，HO-3。HO-2，HO-3呈结构性表达，在体内含量稳定，主要参与血红素的代谢[2]。HO-1（HSP-32）则属于热休克蛋白家族，其对于血红素的分解活性较低，但抗氧化应激作用显著高于HO-2和HO-3，在缺血、缺氧、炎症、内毒素等多种应激因素作用下其基因表达水平可明显上升。诸多研究表明HO-1表达上调与其抗炎、抗凋亡、抗氧化应激有关[2]。胆绿素及胆红素均具有抗氧化功能，代谢副产物CO则能激活鸟苷酸环化酶，使cGMP生成增加发挥组织细胞保护效应[3]，更重要的是，HO-1在转录水平上的改变涉及到细胞内信号通路的影响，如NF-kB[4]，MAPK通路[5]，使其细胞保护的作用机制更为复杂，并且这种作用可能在肿瘤细胞中有特别作用。 近年来，人巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）作为人体潜在的致癌因素备受关注。在器官移植、HIV病人中，HCMV感染常可导致严重后果。相关实验结果显示离体单核细胞感染HCMV后HMOX1基因表达高于正常，可能与炎症反应NF-kB通路激活引起HMOX1表达上升有关。在一组乳腺癌患者中，HCMV DNA在癌细胞中的检出率高于90%[6]，且患者外周血单核细胞HMOX1表达高于正常对照组。基因敲除异粘蛋白（metadherin，一种参与恶性肿瘤转移的膜蛋白），乳腺癌肿瘤细胞中HMOX1表达下降。上述证据均提示了HCMV在参与肿瘤细胞生长过程中通过HMOX1这一基因位点可发挥作用。另外，在非小细胞肺癌治疗时，抑制 MAPK/HO-1信号通路，可以改善肺癌的生长状况[7]，再次表明了HMOX1对肿瘤细胞的生长具有影响作用。 在我国，人巨细胞病毒感染广泛流行，通常情况下，很多正常人身上都潜伏有巨细胞病毒，潜伏部位常在唾液腺、乳腺、肾脏、外周血单个核细胞以及其它腺体中[8]。同时，我国又是肝炎大国，乙型肝炎及无症状HBV携带者约有1.3亿[8]，因此肝癌患者数目也相当客观。通过KEGG查找HMOX1基因参与的细胞代谢通路，发现在肝细胞肝癌的进展过程中有HMOX1基因的表达异常，此种异常可能与miR122有关。多项研究结果表明miR-122是肝脏特异的miRNA,调节脂肪酸、胆固醇的代谢和肝脏的分化,上调嗜肝病毒HCV的复制[9]。miR-122表达的下调可能导致肝细胞肝癌恶化，并且预后不良。有研究表明人巨细胞病毒可通过激活 IL-6-JAK-STAT3 信号通路促进细胞增殖和生长，起到与HBV的协同作用[10]，同时，关于前列腺癌、肺氧化损伤的研究中[11,12]，STAT3可与HO-1相互影响，对细胞的生长起关键作用，提示HMOX1在肝癌细胞中可起到类似作用。 本项目拟通过研究miR-122与HMOX1基因之间的相互作用以及HMOX1参与肝癌细胞生长的作用机制，以明确HCMV在肿瘤发生过程的作用，并为临床HCMV感染提供治疗的方法学基础。 项目的意义： HCMV虽然本身并不编码致癌基因，但其在人群中感染率从50%~100%不等，同时，我国又是肝炎大国，乙型肝炎及无症状HBV携带者约有1.3亿，因此肝癌患者数目相当客观。目前越来越多的研究表明HCMV在肿瘤的生长过程中起到调节作用，作为促癌因素对肝癌的进展可有重要影响。本项目拟通过研究miR-122与HMOX1基因之间的相互作用以及HMOX1参与肝癌细胞生长的作用机制，以揭示HCMV在肝癌发生过程的作用，为肝癌的治疗提供指导思路。 研究现状： 血红素加氧酶(Heme Oxygenase)是体内血红素代谢的限速酶，从血红素α-亚甲基桥处开环以生成胆绿素，胆绿素再在胆绿素还原酶作用下转变为胆红素[1]。体内血红素加氧酶有三种同工酶，分别为HO-1，HO-2，HO-3。HO-2，HO-3呈结构性表达，在体内含量稳定，主要参与血红素的代谢[2]。HO-1（HSP-32）则属于热休克蛋白家族，其对于血红素的分解活性较低，但抗氧化应激作用显著高于HO-2和HO-3，在缺血、缺氧、炎症、内毒素等多种应激因素作用下其基因表达水平可明显上升。诸多研究表明HO-1表达上调与其抗炎、抗凋亡、抗氧化应激有关[2]。胆绿素及胆红素均具有抗氧化功能，代谢副产物CO则能激活鸟苷酸环化酶，使cGMP生成增加发挥组织细胞保护效应[3]，更重要的是，HO-1在转录水平上的改变涉及到细胞内信号通路的影响，如NF-kB[4]，MAPK通路[5]，使其细胞保护的作用机制更为复杂，并且这种作用可能在肿瘤细