分析HPLC法测定痛痹康胶囊中士的宁含量.docVIP

分析HPLC法测定痛痹康胶囊中士的宁含量 　　痛痹康胶囊(原名:仲香胶囊)是在清代《急救应验良方》九分散的基础上加味而成，共由十一味中药材(制马钱子、麻黄、乳香、没药等)组成。痛痹康胶囊为中药六类新药，口前三期临床试验已完成，主要用于治疗腰锥间盘突出症引起的腰腿疼痛、下肢麻木等，其总体有效率可达90%以上。 　　中药及其制剂的内在稳定性是中药现代化研究的关键点之一。方中的君药为制马钱子，其主要成分为马钱子碱和士的j‘，其中士的j‘既是有效成分又是毒性成分。为保证临床用药安全、有效，应当合理控制方中士的j‘的含量l。笔者采用高效液相色谱法(HPI_C)对该制剂中的有效成分士的j‘进行了含量测定，现报道如下。 　　1仪器与试药 　　1. 1仪器 　　Agilent1260高效液相色谱仪(Agilent公司);PDAD光电二极管阵列检测器(Agilent公司);梅特勒XS20;p电子天平(梅特勒公司)。 　　1. 2试药 　　样品:痛痹康胶囊(扬子江药业集团广州海瑞药业自制，批号48120601;对照品:士的j‘，含量为9700(中国食品药品检定研究院，批号:11070;p-200306);正己烷、二氯甲烷、无水甲醇为色谱纯;三乙胺、三氯甲烷、乙酸乙酷 ,氢氧化钠、氨水为分析纯。 　　2方法 　　2. 1色谱条件 　　色谱柱:EC()SII硅胶柱(4.6mm X 250mm,5/m)·流动相:正己烷一二氯甲烷一无水甲醇一三乙胺(47. 5 / 47. 5:5 / 0. 4)，检测波长:280nm，流速:1. OmI_/min，进样量:10/L。 　　2. 2对照品溶液制备 　　精密称取士的j‘(五氧化二磷减压干燥12h)对照品约40mg，置于100m工容量瓶中，用乙酸乙酷溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。再精密量取对照品储备液sm工，置于25m工容量瓶中，用乙酸乙酷稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。 　　2. 3供试品溶液制备方法 　　取痛痹康胶囊颗粒约;p. 0g，精密称定，加氢氧化钠溶液l;p m工使之溶解，放置30min，精密加入三氯甲烷;pOm工，称定重量，超声60min(每lOmin振摇1次)，放冷，用三氯甲烷补足减失的重量，分取三氯甲烷层，滤过。精密量取续滤液20m工，置于水浴中蒸干，残渣加乙酸乙酷溶解，转移并定容至lOm工，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。 　　2.4测定方法 　　分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10/I，注入高效液相色谱仪，测定峰而积，用外标法计算士的j‘含量。 　　3结果 　　3. 1系统适应性试验和专属性试验 　　参照痛痹康胶囊处方制备不含马钱子的阴性样品，研细，按照”2. 3”项所述方法处理，制备阴性对照溶液。取流动相用。. 4;p /m微孔滤膜过滤作为空白样品。精密量取空白样品、阴性对照样品、供试品溶液及对照品溶液各10川，按上述色谱条件测定，记录色谱. 　　结果表明，空白样品和阴性样品在士的j‘对照品保留时间处无干扰，样品色谱中士的j‘与相邻杂质峰的分离度大于1. ;p，士的j‘的理论塔板数为 14 1;p9，均符合要求，该方法具有检测士的j‘的专属性。 　　3. 2精密度 　　精密量取对照品溶液10，连续进样6次，测定样品峰而积。结果表明其平均峰而积为1 074. 296 gt; RSD为0.2;p0o，表明仪器精密度良好。 　　3. 3线性关系考察 　　精密量取上述对照品储备液2/3/:p10/20m工，分别置于2;p m工容量瓶中，用乙酸乙酷稀释至刻度，得到质量浓度分别为31. 00, 46. 50, 77. 50,155. 00, 310. OO/g/mI的系列溶液。分别精密量取上述对照品系列浓度的溶液及对照品储备液各10川，按照”2. 1”所述色谱条件进行测定。以峰而积为纵坐标(Y)，士的j‘质量浓度(x, fig/ m工)为横坐标，进行线性l口l归·得到l口l归方程为y= 7. 108 34x- 21. 971 91,r一0. 999 86。实验结果表明·士的J‘在31. 00-/-387. 40/g/mI_浓度范围内与峰而积线性关系良好。 　　3.4重复性试验 　　分别取同一批号的痛痹康胶囊样品6份，精密称定，按照供试品溶液制备方法处理，并按照”2. 1”所述的士的j‘含量测定方法测定，训一算含量。结果表明，样品中士的j‘平均含量为。.546mg/ggt;RSD为2.000，该方法重复性良好。 　　3