普通遗传学(第五章)技术分析.pptx

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第五章 病毒的遗传分析 学习要点: 1??噬菌体的突变型及基因重组的特点 2 噬菌体的互补测验与顺反子测定 3 用两点测交与三点测交测定噬菌体交换值 4 ?噬菌体基因组结构特点 5 原噬菌体对细菌基因重组的影响(合子诱导) 6 噬菌体的线状染色体与环状连锁图。 第一节 噬菌体的繁殖和突变型 概述 病毒分类p119 一 噬菌体的繁殖 (一)烈性噬菌体的感染周期 (二)温和性噬菌体的感染周期 1 溶源周期: 原噬菌体: 溶源性细菌: 溶源性细菌的特点: 2 裂解周期: 溶源性细菌?自发或经诱发?裂解细菌?释放子噬菌体 二 噬菌体的突变型 (一)快速溶菌突变型(r) (二)宿主范围突变型(h) (三) 条件致死突变型 1 温度敏感突变型 2 抑制因子敏感突变(sus) 噬菌体 细菌 正常基因 sus+ su- (不具备) 突变基因 sus- su+ (具备) (1)抑制因子敏感突变的概念: 如:噬菌体蛋白基因 细菌tRNA基因反密码子 正常 突变 突变 正常 基因:5`TAC 3`?5`TAG 3` 3`ATC 5`?3`ATG 5` ? ? ? ? mRNA 5`UAC 3` 5`UAG 3` 3`AUC 5` 3`AUG 5` ? ? 表型:酪氨酸 终止 5`UAG 3` ?酪氨酸 ?酪氨酸 3`AUC 5` ?酪氨酸 表5-2携带不同专一性抑制基因宿主中sus突变噬菌体的表现 噬菌体基因型 宿主菌基因型 su- su+amb su+och su+op 野生型 sus amber sus ocher sus opal + + + + - + + !!! - - - + - - - - + (2)噬菌体的抑制因子敏感突变型类型及表现 琥珀型(amber)UAG 赭石型(ocher)UAA 乳白型(opal) UGA (二)无义突变与无义抑制突变 无义突变sus-:为氨基酸编码的密码变为终止密码的突变。 无义抑制突变su+:能抑制无义突变表现的突变。 表5-3 5种琥珀抑制基因的性质 琥珀型抑 插入的 合成的蛋白质 赭石型抑 制基因 氨基酸 占野生型% 制基因 su1+ 丝氨酸 28 - su2+ 谷氨酰胺 14 - su3+ 酪氨酸 55 - su4+ 酪氨酸 16 + su5+ 赖氨酸 5 + 第二节 噬菌体突变型的互补试验 (一) ?X174 DNA结构复制 图5-1 (二) ?X174的突变型与互补测验 1、顺反测验原理   利用互补测验确定顺式排列或反式时能否发生功能互补,顺式排列能发生功能互补且反式排列也能互补,属两个顺反子(两个基因)。顺式排列能发生功能互补且反式排列不能互补,是属一个顺反子(一个基因) A群B群互补测验图解 群内为什么不能互补(产生噬菌体)? 互补测验的概念: 简单的感染验证突变体互补功能(互补测验的方法):斑点测试法 2 顺反测验及结果 P124 表5-4 ?X174突变的互补测验结果 顺反子 突 变 型 A am8,am18,am30,am33,am35,am50,am86,tsl28, B am14,am16,och5,ts9,tsl16,och1,och8,och11, C och6 D am10,amH81, E am3,am6,am27, F am87,am88,am89, amH57,op6, op9,tsh6,ts41D G am9,am32,ts,ts79 H amN1,am23,am80,am90,ts4 二、 T4突变型的体外互补试验P125 不但要明白体外可以互补,还

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