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第五章 病毒的遗传分析
学习要点:
1??噬菌体的突变型及基因重组的特点
2 噬菌体的互补测验与顺反子测定
3 用两点测交与三点测交测定噬菌体交换值
4 ?噬菌体基因组结构特点
5 原噬菌体对细菌基因重组的影响(合子诱导)
6 噬菌体的线状染色体与环状连锁图。
第一节 噬菌体的繁殖和突变型
概述
病毒分类p119
一 噬菌体的繁殖
(一)烈性噬菌体的感染周期
(二)温和性噬菌体的感染周期
1 溶源周期:
原噬菌体:
溶源性细菌:
溶源性细菌的特点:
2 裂解周期:
溶源性细菌?自发或经诱发?裂解细菌?释放子噬菌体
二 噬菌体的突变型
(一)快速溶菌突变型(r)
(二)宿主范围突变型(h)
(三) 条件致死突变型
1 温度敏感突变型
2 抑制因子敏感突变(sus)
噬菌体 细菌
正常基因 sus+ su- (不具备)
突变基因 sus- su+ (具备)
(1)抑制因子敏感突变的概念:
如:噬菌体蛋白基因 细菌tRNA基因反密码子
正常 突变 突变 正常
基因:5`TAC 3`?5`TAG 3` 3`ATC 5`?3`ATG 5`
? ? ? ?
mRNA 5`UAC 3` 5`UAG 3` 3`AUC 5` 3`AUG 5`
? ?
表型:酪氨酸 终止 5`UAG 3`
?酪氨酸
?酪氨酸
3`AUC 5`
?酪氨酸
表5-2携带不同专一性抑制基因宿主中sus突变噬菌体的表现
噬菌体基因型
宿主菌基因型
su- su+amb su+och su+op
野生型
sus amber
sus ocher
sus opal
+ + + +
- + + !!! -
- - + -
- - - +
(2)噬菌体的抑制因子敏感突变型类型及表现
琥珀型(amber)UAG
赭石型(ocher)UAA
乳白型(opal) UGA
(二)无义突变与无义抑制突变
无义突变sus-:为氨基酸编码的密码变为终止密码的突变。
无义抑制突变su+:能抑制无义突变表现的突变。
表5-3 5种琥珀抑制基因的性质
琥珀型抑 插入的 合成的蛋白质 赭石型抑
制基因 氨基酸 占野生型% 制基因
su1+ 丝氨酸 28 -
su2+ 谷氨酰胺 14 -
su3+ 酪氨酸 55 -
su4+ 酪氨酸 16 +
su5+ 赖氨酸 5 +
第二节 噬菌体突变型的互补试验
(一) ?X174 DNA结构复制 图5-1
(二) ?X174的突变型与互补测验
1、顺反测验原理
利用互补测验确定顺式排列或反式时能否发生功能互补,顺式排列能发生功能互补且反式排列也能互补,属两个顺反子(两个基因)。顺式排列能发生功能互补且反式排列不能互补,是属一个顺反子(一个基因)
A群B群互补测验图解
群内为什么不能互补(产生噬菌体)?
互补测验的概念:
简单的感染验证突变体互补功能(互补测验的方法):斑点测试法
2 顺反测验及结果
P124 表5-4 ?X174突变的互补测验结果
顺反子 突 变 型
A am8,am18,am30,am33,am35,am50,am86,tsl28,
B am14,am16,och5,ts9,tsl16,och1,och8,och11,
C och6
D am10,amH81,
E am3,am6,am27,
F am87,am88,am89, amH57,op6, op9,tsh6,ts41D
G am9,am32,ts,ts79
H amN1,am23,am80,am90,ts4
二、 T4突变型的体外互补试验P125
不但要明白体外可以互补,还
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