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四.糖尿病的生物化学检测（一）测定血液中的葡萄糖含量
* 四.糖尿病的生物化学检测： （一）测定血液中的葡萄糖含量 测定血糖的方法很多，按其测定原理可分为三类： 1.无机化学法： 所用试剂均为无机化学试剂 ?氧化亚铜法（又称Folin-Wu法） 〖原理〗 葡萄糖 + 还原碱性铜盐（Cu） CuO + 磷钼酸 钼蓝 ?铁氰化钾法 操作简便试剂易得，费用低 特异性差 谷胱甘肽 葡萄糖醛酸 尿酸 VitC 已淘汰。 偏高 2.有机化学方法： 利用糖的羰基与有机试剂反应测糖。 Hultmen使用邻甲苯胺试剂（Otoluidine，O-T）测定血糖。 〖原理〗 血清 + 冰醋酸 + 邻甲苯胺 （葡糖糖） 5羟甲基2呋喃甲醛 + 邻甲苯胺 蓝色的醛亚胺（Schiff碱） 3.生物化学法： 主要是酶法 ?葡萄糖氧化酶法（Glucose Oxidase，GOD） 〖原理〗 葡萄糖氧化酶 葡萄糖 葡萄糖酸 + 过氧化氢 H2O2 + 4-氨基安替比林+ 酚 O2 +有色化合物 其颜色深浅同血糖浓度呈正比。 过氧化物酶 葡萄糖氧化酶法特点： 操作简便，特异性较高 推荐方法 溶血（胆色素0.34mol/L） VitC 5mg/L以上 左旋多巴（0.5mol/L） 谷胱苷肽 100mg/L 本法第一步是特异反应，第二步特异性差，误差往往发生在反应的第二步。 负偏差 葡萄糖 + ATP G6P + ADP G6P + NADP 6-磷酸葡萄糖酸+ NADPH NADPH的生成速率与葡萄糖浓度成正比，在波长340nm监测吸光度升高速率，计算血清中葡萄糖浓度。 ? 己糖激酶 G6PD ?己糖激酶法 〖原理〗 己糖激酶法的特点 参考方法 试剂盒贵 轻度溶血 脂血、黄疸、 VitC NaF、肝素、EDTA、草酸盐 但从红细胞中释放出来的有机磷酸酯和一些酶能消耗NADP，有干扰。 ? ?葡萄糖脱氢酶法 无干扰 （二） 测定尿中葡萄糖 临床初判断作为过筛 正常人24小时尿糖 0.5g 尿糖试验 （—） 1.班氏试剂：CuSO4 Glu Cu＋砖红色 2.尿10A：干酶试剂、折光仪比色 （三）?口服葡萄糖耐量试验(Oral glucose tolerance test , OGTT） 一种葡萄糖负荷试验，了解机体对葡萄糖的调节作用。 空腹血糖浓度6～7mmol/L，+OGTT OGTT 试验前准备： a 试验前三天，每日食物中糖?150g b 影响试验药物停用3d c 试验前病人10～16h未进食 d 坐位取血5min后饮250ml含75g无水葡 萄糖水，以后每隔30min取血一次，共 四次，历时2h。 30 60 90 120 150 （min） 5 10 mmol/L 正常人 糖耐量受损 糖尿病 肾糖阈 1.正常糖耐量 （1）空腹静脉血浆葡萄糖6mmol/L （2）口服葡萄糖后30～60min达高峰，峰 值不超过10mmol/L （3）2小时回复到空腹水平。 ? 2.糖尿病性糖耐量 糖尿病患者由于胰岛素相对和绝对缺乏，对糖负荷的耐受能力降低。 ?空腹血浆葡萄糖浓度7.8mmol/L ?峰值超过10mmol/L并出现糖尿 ?延迟（2小时后）回复到空腹水平 判断指标是服葡萄糖后2小时的血浆葡萄糖值增高。 ? *
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