2016-2017学年高中生物 专题5 生态工程模块综合检测 新人教版选修3.docVIP

生态工程模块综合检测 (时间：60分钟　满分：100分)1．(10分)胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一1是该方法所用的基因表达载体图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β－半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题。 图1 图2(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是________。(2)图1中启动子是__________________酶识别和结合的部位有了它才________________________________________________________ ______________________________________________________。(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有________________________________________________________。(4)β－半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部其意义在于。(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链且β－半乳糖苷酶被切成多个肽段这是因为________________________________________。(6)根据图2中胰岛素的结构请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是____________理由是_____________。答案：(1)终止子(2)RNA聚合　作为标记基因将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来(3)限制酶和DNA连接酶(4)防止胰岛素的A、B 链被菌体内蛋白酶降解(5)β－半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸而胰岛素A、B 链中不含甲硫氨酸(6)至少2个　两条肽链的一端各有一个游离的氨基氨基酸R 基团中可能还含有游离的氨基(10分)GDNF是一种神经营养因子对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示)并导入到大鼠神经干细胞中用于干细胞基因治疗的研究。请据图回答下列问题。 (1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中使用胰蛋白酶的目的是________________。(2)构建含GDNF基因的表达载体时需选择图1中的________限制酶进行酶切。(3)经酶切后的载体和GDNF3种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式选择酶和酶对筛选得到的载体进行双酶切并对酶切后的DNA片段进行电泳分析结果如图2所示。图中第________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后为了检测GDNF基因是否成功表达可用相应的________与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密________培养以得到更多数量的细胞用于神经干细胞移植治疗实验。解析：(1)动物细胞间的物质主要成分是蛋白质用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间目的是使组织中的细胞分散成单个细胞。(2)据图1可知基因两端和载体上都有限制酶的酶切位点。(3)据图1可知用和限制酶对三种载体进行酶切单个载体自连只有限制酶的酶切位点得到6 000 bp DNA的片段；正向连HpaⅠ和限制酶的酶切位点得到700 bp DNA的片段和6 000 bp DNA的片段；反向连接重组载体有和 限制酶的酶切位点得到200 bp DNA的片段和的片段。(4)检测目的基因是否成功表达可采用抗原－抗体杂交法。培养的原代细胞贴满瓶壁重新用胰蛋白酶等处理然后分瓶继续培养让细胞继续增殖这样的培养过程通常称为传代培养。传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去科研上使用的正常细胞通常为10代以内答案：(1)使细胞分散开　(2)　(3)②　(4)抗体　传代(10分)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白其技术路线如图。 (1)由过程①获得的A为_________________________________。(2)在核移植之前必须先去掉受体卵母细胞的核目的是________________________________________。受体应选用________期卵母细胞。(3)进行胚胎移植时代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生_____________这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆理论上可获得无限个转基因绵羊这是因为________________________________________________________________。解析：(1)根据题意可知要将人凝血因子IX基因导入绵羊胎儿成纤维细胞必须构建基