基因工程的复习课件.pptVIP

6、前景：见教材P28 习题反馈： 见《创》P205 * 1、　(2010年江苏卷)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： (1)一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有______个游离的磷酸基团。 (2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越______。 (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是______。 (4)与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止______。 (5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入______酶。 (6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了______。 (7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在______的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。 2.下列有关基因工程技术的正确叙述是(　　 ) A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 C 3、以重组DNA技术为核心的基因工程正在改善着人类的生活。请回答下列问题： （1）获得目的基因的方法通常包括__________ 和__________。 （2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是_________ 和_________。 （3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或___________，后者的 形状呈 ___________。 （4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率 _______。所以在转化后通常需要进行___________操作。 （5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和 ___________序列上是相同的。 限制性核酸内切酶（限制酶） 化学合成（人工合成） 酶切获取（从染色体DNA分离/从生物细胞分离） DNA连接酶（连接酶） 质粒 小型环状（双链环状、环状） 低 筛选 氨基酸 五、基因工程的应用 1．转基因植物：抗虫转基因植物、抗病转基因植物、抗逆转基因植物、改良植物品质。（见P17-19） 2．转基因动物：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物作器官移植的供体.（见P20-21） 3．其他应用：基因工程药物、基因治疗。 （见P20-21） 六、蛋白质工程 1．蛋白质工程崛起缘由：基因工程原则上只能生产____________的蛋白质。 2．蛋白质工程的概念：蛋白质工程是指以______________结构规律及其与生物功能的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对______________进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产或生活需要。 自然界原有 蛋白质分子 现有蛋白质 3．蛋白质工程的基本内容 目标：根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。 过程：预期功能→蛋白质三维结构→氨基酸序列(多肽链)→基因→具有预期功能的蛋白质 4、特例：教材P26 见教材P27 5、蛋白质工程与基因工程的比较 蛋白质工程 基因工程 区别 过程 预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→基因→预期蛋白质 获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实质 定向改造或生产人类所需的蛋白质 定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品 结果 可产生自然界没有的蛋白质 只能生产自然界已有的蛋白质 结果 (1)蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程 (2)基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造 （2010年天津卷)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,Bam HI、Hind III、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点。 高考热点突破： 据图回答： (1)图中将人乳蛋白基因插入载体，需用____________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含____________的培养基上进行。 (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_______(填字母代号)。 A．启动子　　　　　B. tetR　　 C．复制原点 D. ampR (3)过程①可采用的操作方法是_______(填字母