基因重组人血白蛋白与华北制药王平华北制药股份有限公司董事长.ppt

2011-04-01 * 结构分析 对于疫苗等微量输人的重组蛋白来说，99.999%的纯度已经足够，但相对于rHSA该纯度依然很低，因为白蛋白每次注射量至少10g，这意味着至少有0.Img的杂质同时输人人体，若其为有害杂质，将可能产生生命危险。目前rHSA纯化研究已取得很多突破性进展，已有纯度高达99.999999%的研究报道，同时纯化得到的高纯度rHSA与pHSA在分子结构上完全相同，且SDS分析、HPLC分析及配基结合能力均相同。 2011-04-01 * 重组人血清白蛋白临床研究 英国的DELT公司用酿酒酵母生产的 rHSA完成了一期临床试验。日本三菱公司用毕赤酵母生产的 rHSA 已经完成了三期临床试验。 2011-04-01 * rHSA 的应用展望 替代人血源HSA产品。由于HSA是一种多功能蛋白，因其具有无酶活性且无免疫原性等特点，rHSA 可作为赋形剂和稳定剂及无血清细胞培养基的组分。此外由于具有抗氧化性，rHSA 也被用作药物载体从而赋予药物更好的理化特性(肽类和蛋白质类药物在体内很难渗透进入血脑屏障,但通过嵌合肽可实现肽或蛋白质药物向脑的转运。)。rHSA 的广泛应用将为人类血液和血液制品翻开新的篇幅。 2011-04-01 * THANKS 2011-04-01 * 人血清白蛋白的酵母重组表达研究进展 2011.04.01 2011-04-01 * 人血清白蛋白供需不平衡 监管严格 采血站数量下降 血液传染病病毒泛滥 不再审批新的生产企业 进口受到严格限制 需求量巨大 2011年02月12日有文章称《血液制品“告荒”》 国内血液制品的严重短缺。这类产品，除了人血白蛋白，其他的血液制品如乙肝免疫球蛋白、静脉丙种球蛋白等都处于严重短缺的状态。 来源网址：凤凰网财经频道/roll3389405.shtml 2011-04-01 * 主要内容 国内外进展 酵母表达体系的建立 rHSA在毕赤酵母的表达 影响酵母表达外源蛋白的因素 提高rHSA表达的一些策略 rHSA在汉逊酵母中的表达与纯化 新型集成干扰素-人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达和纯化 rHSA 结构分析 rHSA 的应用展望 2011-04-01 * 国内外研究进展 Lawn R .M. 等在1981年首次报道了重组人血白蛋白(Recombinant Human Serum Albumin ,rHSA)cDNA序列和首次采用色氨酸(Trp)启动子，色氨酸引导肽及来自质粒pBR322的Tcr和Ampr基因构建了第一个表达重组人血白蛋自的表达载体pHSAI并在大肠杆菌(E.coli)中得到了成功表达。HSA在大肠杆菌中表达量为细胞总蛋白的7%，但由于HSA含有大量的二硫键使得其在体外极难完成正确折叠，未能得到有生物功能的蛋白;同时细菌细胞壁脂多糖造成热反应也带来很多麻烦。 2011-04-01 * 国外研究进展 国外许多实验室和公司在重组白蛋白方面进行了大量研究，如英国的DELTA公司，美国的GENETECH公司以及日本的三菱公司等。日本在重组人血白蛋白方面的研究走在了最前面。1994年日本的绿十字GREEN CROSS（三菱公司的前身)公司被批准进人二期临床，现在日本三菱公司已完成三期临床。该公司已经建厂进行大规模生产，一期工程完毕可达12.5吨/年的生产能力，并计划逐步提高到40吨/年，已预定商品名“Albrec”,所生产的产品纯度可达99.999999%,英DELTA公司已经完成一期临床试验，美国等正处于临床前研究阶段。 2011-04-01 * 国内研究进展 近几年来，我国也掀起了重组HSA的研究热潮，华北制药集团、中科院上海生化所、华东理工大学、中山医科大学、中科院微生物所、过程工程研究所，以及安徽中科大亚杰科技股份有限公司等单位己经开始利用基因重组技术生产白蛋白的研究;目前我国在这方面的研究工作已经取得一定进展。 华东理工大学郭美锦，储炬等于2000年发表文章称该校生物反应器工程国家重点实验室已经采用 Pichia pastoris 进行了高密度高表达发酵研究,表达水平已达到5 克/ 升左右。 2011-04-01 * 来源网址：/redirect.php?tid=3180088goto=lastpost 华北制药： 药用基因工程重组人血白蛋白研发及产业化项目 华北制药集团新药研究开发有限责任公司从1997年开始采用毕赤酵母作为宿主菌分泌表达重组人血白蛋（rHSA ）。经过多年的努力，通过与国内外有关单位协作，已建立了从菌种构建至发酵、纯化的完整工艺。已得到稳定高效表达人血白蛋白的基因工程生产菌株