项目名称动物重要病原菌功能基因组与分子致病机理研究首席.doc

项目名称： 动物重要病原菌功能基因组与分子致病机理研究 周锐 华中农业大学 2012.1-2016.8 依托部门： 教育部 湖北省科技厅   二、预期目标 （一）总体目标 以结核分枝杆菌复合群、猪链球菌和副猪嗜血杆菌为研究对象，初步阐明结核在牛和人中的流行特征与传播规律，猪链球菌和副猪嗜血杆菌优势血清型和致病性的动态变化，揭示病原菌基因组序列的变异、毒力多样性和抗原多样性的遗传基础；解析病原菌的蛋白质相互作用与基因调控网络，及表面多糖的结构、合成机制与功能，阐明病原菌的生长、代谢、毒力调控、DNA损伤修复与耐药机制，发掘新的功能基因、蛋白质和表面多糖；研究病原菌及其蛋白质和表面多糖与宿主的相互作用及其信号传导途径，初步阐明病原菌的感染、致病、免疫应答和免疫逃避的机制，为这三种传染病的防控提供必要的科学理论依据。 （二）五年预期目标 1．揭示结核分枝杆菌复合群、猪链球菌和副猪嗜血杆菌在动物中的流行规律与生态分布，阐明优势血清型和变异株与致病性间的关系，重点探讨结核分枝杆菌复合群在牛和人间流行的传播机制，为这三大疾病的防控提供理论依据。 2．分离鉴定和收集分枝杆菌500株，其中牛源结核分枝杆菌200株（人型及牛型）、猪链球菌和副猪嗜血杆菌2000株，建立基因组多态性数据库和基因组多态性研究的技术平台，阐明主要流行株的基因组序列变异和进化规律。 3．完善和构建结核分枝杆菌和猪链球菌的蛋白质相互作用网络和转录调控网络，初步阐明细菌生长、代谢和毒力调控的分子机制，揭示结核分枝杆菌DNA损伤修复与耐药之间的关系。 4．鉴定牛分枝杆菌的乙酰化蛋白谱及Sir2蛋白的底物蛋白谱，揭示Sir2蛋白与牛分枝杆菌致病性及药物作用机理之间的关联性。 5．鉴定结核分枝杆菌和猪链球菌表面多糖及结核分枝杆菌细胞壁多糖的生物合成途径中的糖基供体合成酶基因和糖基转移酶基因，完成10种糖基供体合成酶和糖基转移酶基因的克隆及表达，并确定其在病原菌表面多糖生物合成途径中的功能；完成5种糖基转移酶基因对病原菌生长及感染影响的分析；解析1-2种重要表面多糖的组分和结构，明确其在细菌生长及致病中的关键作用。 6．初步阐明人结核分枝杆菌对牛的致病特征；鉴定猪链球菌、副猪嗜血杆菌及结核分枝杆菌的新的毒力相关基因20个以上，完成8－10个毒力因子与宿主细胞的相互作用及其信号传导通路研究，初步阐明猪链球菌与副猪嗜血杆菌的协同致病作用和机制。 7．鉴定结核病发生、发展与转归过程的分子标识；初步阐明自噬在牛分枝杆菌感染的先天性免疫和获得性免疫中的作用及其机制，揭示牛分枝杆菌免疫逃避以及引起慢性炎症的机制；阐明猪链球菌引起急性炎症和导致炎症紊乱的机制。 8．发表SCI收录论文50－60篇，申请/获得专利15－20项，培养5－6名左右中青年学术骨干，培养研究生100－150名。  三、研究方案 （一）总体研究思路、项目研究的技术路线及可行性分析 1．总体研究思路 结核分枝杆菌复合群、猪链球菌和副猪嗜血杆菌是严重危害畜牧业健康发展和人民健康的重要病原菌，其血清型或基因型复杂；结核分枝杆菌复合群和猪链球菌的宿主谱广，可在人和动物间相互传播，但其传播链和传播机制尚不清楚；三种病原菌常与其它病原微生物混合感染和继发感染，形成复杂的病原生态学关系，其单独致病和协同致病的机制，病原菌诱导宿主的先天性和获得性免疫反应，以及病原菌免疫逃避和持续感染的机制等，都是动物细菌性传染病研究领域复杂和关键的科学命题。本项目从病原菌的分离鉴定和收集及流行规律、生态分布和基因组序列变异等研究入手，揭示病原菌的流行与传播机制、流行血清型和致病性的动态变化及毒力多样性和抗原多样性的遗传基础；进而以代表性的菌株为研究对象，构建病原菌的蛋白质互作与基因调控网络，研究病原菌表面多糖的合成机制与功能，揭示病原菌生长、代谢、毒力调控和耐药机制，预测和鉴定新的功能基因、蛋白质和表面多糖；深入研究病原菌及其蛋白质和表面多糖与宿主的相互作用，揭示病原菌的感染、致病、免疫应答和免疫逃避的机制，为这三种传染病的防控提供必要的科学理论依据。 2．技术路线 3．可行性分析 工作基础：本项目是在2010年结题验收的973计划重大传染病基础研究专题“重要动物病原菌的分子生物学与致病机理研究”（2006-2010）的基础上滚动申报的。已结题的973计划项目在科学研究、人才培养、平台建设、重要成果等方面均超额完成了计划任务，并被评为“优秀”。本项目研究仍然以结核分枝杆菌复合群、猪链球菌和副猪嗜血杆菌为主要研究对象，拟解决的关键科学问题是在上一个项目研究的基础上提炼出来的，研究内容是上一个项目的延续和深入，申报单位和主要学术骨干均参与了上一个973计划项目的研究，并取得重要研究成果。因此，本项目有