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一、标本采集
项目 评价 阿米巴滋养体 从粪便脓血和稀软处取材,立即送检; 运送及检查时均需保温,保持滋养体活力 血吸虫孵化毛蚴 标本至少30g,必要时取全份标本送检;如查寄生虫虫体及作虫卵计数时,应采集24h粪便 蛲虫卵 用浸泡生理盐水棉签或透明薄膜拭子于晚12时或晨排便前,自肛门皱襞处拭取粪便送检 连续送检 原虫和某些蠕虫有周期性排卵现象,未查到寄生虫和虫卵时,应连续送检3天,以免漏检 二、标本处理 1检毕标本应作为生物垃圾进行焚化处理 2容器、玻片等应以消毒液浸泡24h后流水冲洗晾干备用 一、理学检验:粪便量 与进食种类、量及消化器官功能状态有关,一般健康成人排便次数可隔天1次到每天2次,每次排便量约为100-200g,当胃肠、胰腺功能紊乱或有炎症时粪便量及排便次数可增加 一、理学检查:颜色 颜色 临床意义 黄褐色 正常人含粪胆素 淡黄色 乳儿便;服用大黄、山道年 绿色 食用大量绿色蔬菜;甘汞,乳儿肠炎,胆绿素 白色、灰白色 钡餐后、胆道阻塞、阻塞性黄疸、胰腺病 红色 食用西瓜蕃茄等;直肠癌、肛裂、痔疮出血 果酱色 阿米巴痢疾,肠套,食用大量咖啡、巧克力 黑色或柏油色 上消化道出血,服用铁剂与铋剂 一、理学检查:性状 一、理学检验:寄生虫 粪便中可见虫体或其片段 二、 化学检查 1粪便隐血试验(fecal occult blood test、FOBT) 上消化道出血量少于5ml,粪便中无可见的血液,红细胞破坏,显微镜检查也未见红细胞,而需采用化学法、免疫法等才能证实的出血,称为隐血。 检测原理:化学法 血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性,能催化氧化底物邻甲联苯胺脱氢为邻甲偶氮苯(显蓝色) 方法学评价 方法学评价 各种粪便隐血试验均有优缺点,国内外尚无统一公认的标准化方法,美国胃肠病学学会推荐愈创木酯化学法或免疫法 因素 评价 标本因素 ①假阴性:因粪便标本陈旧灵敏度减低,血液在肠道停留过久,血红蛋白被细菌降解,血红素消失②假阳性:粪便隐血来源于非消化道如齿龈出血、鼻出血、月经血等 食物因素 假阳性见于含血红蛋白的动物血,如鱼、肉、肝脏,含过氧化物酶的叶绿素新鲜蔬菜 药物因素 ①假阳性:使用铁剂、铋剂,引起胃肠道出血药物如阿司匹林、皮质醇、非类固醇抗炎药、引起肠炎药物、秋水仙素、萝芙木碱中药②假阴性:服用大量维生素C或其他具有还原作用药物 器材和试剂 ①假阳性:器材污染铜离子、铁离子、消毒剂、溴、铁、硼酸、过氧化物酶②假阴性:过氧化氢浓度低或过氧化氢失效、试剂保存温度和湿度不当如冰冻、受光、受热和受潮等可失效 操作过程 假阴性见于试验反应时间不足、显色判断不准。试验前在标本中加水减低灵敏度,而实际上同时增高了假阳性 检测原理:免疫法 常用免疫胶体金法。胶体金是由氯化金和枸橼酸合成的胶体物质呈紫红色。胶体金与羊抗人血红蛋白单克隆抗体和鼠IgG吸附在特制的乙酸纤维膜上,形成一种有标记抗体的胶体金物质,再在试带上端涂上包被羊抗人Hb多抗和羊抗鼠IgG抗体。检测时,将试带浸入粪悬液中,悬液通过层析作用,沿试带上行。如粪便中有Hb,在上行过程中与胶体金标记羊抗人Hb单抗结合,待行至羊抗人Hb多抗线时,形成金标记抗人Hb单抗-粪Hb-羊抗人Hb多抗复合物,在试带上显现1条紫红色线(阳性),试带上无关的金标记鼠IgG随粪悬液上行至羊抗鼠IgG处时,与之结合形成另1条紫红色线,为试剂质控对照线。 方法学评价:免疫法 免疫胶体金法优点较多 灵敏度和特异性:美国癌症学会认为免疫法在特异性和灵敏度上等于或好于愈创木酯法,不受食物因素影响,无须禁食,不受动物血红蛋白和辣根过氧化物酶的干扰 因素 评价 生理因素 胃肠道每24h排出血液0.5-1.5ml,个别可达3ml,长跑运动员可达4ml,服用阿司匹林2.5g,即可引起消化道出血2-5ml,免疫学检查呈阳性 标本因素 假阴性见于消化道大量出血,出现后带现象,还见于上消化道出血,血红蛋白降解变性,失去免疫原性或单抗与血红蛋白不匹配 食物因素 各种动物血红蛋白、辣根过氧化物酶无干扰 药物因素 正常人或服用刺激胃肠道药物后可造成假阳性 器材和试剂 试剂保存不当或失效出现假阴性 操作过程 直接使用低温保存(15℃以下)的标本试验,可出现假阴性结果 其他方法 1血红蛋白荧光测定:采用卟啉荧光血红蛋白定量试验,除可测定粪便中未降解的血红蛋白外,还可测定血红素衍化
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