2.2动物细胞工程.pptVIP

1、 许多有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等，都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产。 2、用取自烧伤病人皮肤的健康细胞进行培养，可以获得大量自身的皮肤细胞，为大面积烧伤的病人移植。 3、培养的动物细胞用于检测有毒物质。 4、医学家培养各种正常的或病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。 * 2.2 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 生产单克隆抗体 核移植技术 动物细胞工程技术 其他动物细胞工程技术的基础 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 动物细胞培养技术 （一）、概念 是指从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 （二 ）、过程 转入培养液中进行原代培养 相关的概念： 1 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上生长的特点 2 接触抑制： 贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象 3 原代培养： 人们通常将动物组织消化后的初次培养。 归纳： 取 的组织、器官 细胞悬浮液 酶 贴满瓶壁的细胞 单个细胞 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白 加入培养液培养 传代培养 原代培养 思考题： 1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。 成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。 3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。 4、细胞膜的主要成份是什么？ 蛋白质和磷脂 5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 能 6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？ 7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 1、无菌、无毒的环境 保证细胞顺利的生长增殖 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） （葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、 维生素、动物血清等。） （四）、动物细胞培养的条件 2、营养 3、温度和PH 哺乳动物：36.5 ± 0.5℃, 多数细胞PH: 7.2~7.4 培养箱中提供O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 4、气体环境： 细胞的全能性 大量的细胞 植物体或组织 培养结果 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物组织培养和动物细胞培养的比较 （五）、动物细胞培养技术的应用 （一）、概念： 将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 克隆动物：用核移植的方法得到的动物。 动物细胞核移植 （二）、分类： 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复 全能性容易 细胞分化程度高，恢复 全能性困难 体细胞的核移植过程 （四）、体细胞核移植技术的应用前景 1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群繁育。 2、保护濒危物种 3、转基因克隆动物可以作为生物反应器来生产医用蛋白质，另外还可以作为组织器官的移植的供体 （五）、体细胞核移植技术存在的问题 1、成功率底下。 2、绝大多数的克隆动物存在着畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。 3、克隆动物的食品安全性问题存在着争议。 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 （　 ）　　 A．获得不死性的细胞 B．10代以内细胞 C．原代细胞 D．传代细胞 1、动物细胞工程技术的基础是 （ 　）　 A.动物细胞融合 B.单克隆抗体　 C.胚胎移植 D.动物细胞培养 A D 课堂反馈练习 3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（ ） A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞 分泌蛋白 B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散 C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡 过程中 D、培养至50代后传代细胞遗传物质没有发生改变 B 4、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ） ①无毒的环境 ②无菌的环境 ③培养基需要加入血清 ④温度与动物体温相似 ⑤需要O2，不需要CO2 ⑥CO2能调节