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填空题 1 基因工程是__?_______年代发展起来?的遗传学的一个分支学科。 ?2基因工程的两个基本特点是?： (1)_______?_____，(2)____?_______。 3．基因?克隆中三个基本要点是：__?_________；___?______和______?____。 4． 通过比较?用不同组合的限制性内切核酸?酶处理某一特定基因区域所得?到的不同大小 的片段，?可以构建显示该区域各限制性?内切核酸酶切点相互位置的_?__________。 5?．限制性内切核酸酶是按属名?和种名相结合的原则命名的，?第一个大写字母取自____?___，第二、三两个字母取?自_________，第四?个字母则用________?___表示。 6．部分酶切?可采取的措施有：(1)__?__________(2)?___________ (?3)___________?等。 7．第一个分离的限制?性内切核酸酶是______?_____；而第一个用于构?建重组体的限制性内切核酸酶?是____________?_。 8．限制性内切核酸酶?BsuRI和HaeⅢ的来源?不同，但识别的序列都是__?_______，它们属于_?____________。? 9．DNA聚合酶I的Kl?enow大片段是用____?_________切割DN?A聚合酶I得到的分子量为7?6kDa的大片段，具有两种?酶活性： (1)____?________； (2)?_____________?___的活性。 10．为了?防止DNA的自身环化，可用?_____________?去双链DNA_______?___________。 ?11．EGTA是_____?_______离子螯合剂。? 12．测序酶是修饰了的T?7 DNA聚合酶，它只有_?____________酶?的活性，而没有______?_酶的活性。 13．切口移?位(nick transl?ation)法标记DNA的?基本原理在于利用_____?____的_______和?______的作用。 14?．欲将某一具有突出单链末端?的双链DNA分子转变成平末?端的双链形式，通常可采用_?________或____?___________。 ?15．反转录酶除了催化DN?A的合成外，还具有____?________的作用，可?以将DNA-RNA杂种双链?中的___________?水解掉。 16．基因工程中?有3种主要类型的载体： _?_____________?_、___________?__、__________?____。 17．就克隆一?个基因(DNA片段)来说，?最简单的质粒载体也必需包括?三个部分：________?_______、_____?________、____?__________。另外?，一个理想的质粒载体必须具?有低分子量。 18．一个?带有质粒的细菌在有EB的培?养液中培养一段时间后，一部?分细胞中已测不出质粒，这种?现象叫 ________?_______。 19． ? pBR322是一种改造型?的质粒，它的复制子来源于_?_____________? ，它的四环素抗性基 因来?自于 ________?_______，它的氨苄青?霉素抗性基因来自于____?___________。 ?20．YAC的最大容载能力?是____________?___，BAC载体的最大容?载能力是_________?______。 21．pS?Cl01是一种______?_________复制的质?粒。 22．pUCl8质粒?是目前使用较为广泛的载体。?pUC系列的载体是通过__?_____________? 和 _________?______ ? 两种?质粒改造而来。它的复制子来?自____________?___ ，Amp抗性基因?则是来自 ______?_________。 23?．噬菌体之所以被选为基因工?程载体，主要有两方面的原因?：一是__________?_____； 二是____?___________。 ?24． 野生型的M13不适?合用作基因工程载体，主要原?因是 ? ? _________?_____和 ___?____________。? 25．黏粒(cosmid?)是质粒—噬菌体杂合载体，?它的复制子来自______?_________、COS?位点序列来自_______?________，最大的克?隆片段达到________?_______kb。 26?．野生型的?噬菌体DNA不?宜作为基因工程载体，原因是?：(1) ?