第七章临床常用免疫学检查课件.ppt

第七章 临床常用免疫学检查 第一节 血清免疫球蛋白检测 一、 免疫球蛋白G检测 二、 免疫球蛋白A检测 三、 免疫球蛋白M检测 四、 免疫球蛋白D检测 五、 免疫球蛋白E检测 六、 血清M蛋白检测 一、 免疫球蛋白G检测 免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)为人体含量最多和最主要的Ig，占免疫球蛋白的70~80%。它对病毒、细菌和寄生虫等都有抗体活性，也是唯一能够通过胎盘的Ig。单向免疫扩散法（RID）是将抗IgG血清均匀地混合于琼脂糖凝胶板内，打孔，加样。待检标本中的抗原（相应IgG）则产生扩散，与抗IgG形成沉淀环，沉淀环的面积与相应抗原（IgG）含量相关。 二、 免疫球蛋白E检测 免疫球蛋白E（immunoglobulin IgE）为血清中最少的一种Ig，约占血清总Ig的0.002%：它是一种亲细胞性抗体，与变态反应、寄生虫感染及皮肤过敏等有关。 六、血清M蛋白检测 M蛋白（M protein）或称单克隆免疫球蛋白，它是一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。 第二节 血清补体检测 补体（complement，C）是一组具有酶原活性的糖蛋白，它由传统途径的9种成分C1（C1q、C1r、C1s）~C9，旁路途径的3种成分及其衍生物、B、D、P、H、I等因子组成。补体、体液因子或免疫细胞共同参与灭活病原体的免疫反应，也参与破坏自身组织或自身细胞而造成的免疫损伤。 一、总补体溶血活性检测 总补体溶血活性（total hemolytic complement activity，CH50 ）以溶血素（抗体）致敏的绵羊红细胞（抗原抗体复合物）激活待测血清中的C1，进而引起补体活化的连锁反应，在绵羊红细胞上形成多分子聚合物，影响其膜表面的结构与功能，最终导致羊红细胞溶解。溶血程度与补体量呈正相关，为S型曲线关系。故一般以50%溶血作为检测终点（CH50 ），较为灵敏、准确。 四、补体C3检测 补体C3(complement C3,C3)是一种由肝脏合成的β2-球蛋白，由α和β两条多肽链组成。 C3在补体系统各成分中含量最多，是传统途径和旁路途径被激活的关键物质。 第三节 细胞免疫检测 人体的淋巴细胞分为T、B和NK等细胞群，它们又分别有若干亚群，各有其特异的表面标志和功能。临床上各种免疫病均可出现不同群淋巴细胞数量和功能的变化。对它们进行检测可用以判断细胞免疫功能。 一、 T细胞免疫检测 （一） T细胞花结形成试验 （二） T细胞转化试验 （三） T细胞分化抗原测定 T细胞膜表面有10０多种特异性抗原，现已制备了多种单克隆抗体，WHO（１９８６）统称为白细胞分化抗原（cluster differentiation,CD）。例如CD３代表总T细胞，CD４　代表T辅助细胞（TH），CD８代表T抑制细胞（Ts）等。应用这些细胞的单克隆抗体与T细胞表面抗原结合后，再与荧光标记二抗（兔或羊抗鼠IgG）反应，在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数CD的百分率。 二、 B细胞免疫检测 （一） B细胞膜表面免疫球蛋白测定 （二） 红细胞－抗体－补体花环形成试验 （三） B细胞分化抗原测定 三、 自然杀伤细胞免疫检测 （一）、自然杀伤细胞活性测定 （二）、抗体依赖性细胞介导的细胞毒测定 四、 细胞因子检测 （一） 白细胞介素２活性和白细胞介素２受体测定 （二）干扰素测定　 （三） 肿瘤坏死因子测定　肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)分为TNFα和TNFβ两型。前者来源于单核细胞、吞噬细胞；后者来源于T淋巴细胞。两型的结构虽然不同，但生物活性类似。两型都有引起肿瘤组织出血、坏死和杀伤作用，都可引起抗感染的炎症反应效应，以及对免疫细胞的调节、诱生作用。 第四节 病毒性肝炎血清标志物检测 病毒性肝炎主要有５型，即甲型（HA）、乙型（HB）、丙型（HC）、丁型（HD）和戊型（HE），它们分别由肝炎病毒甲型（HAV）、乙型（HBV）、丙型（HCV）、丁型（HDV）和戊型（HEV所引起。HDV是一种缺损性病毒，依附HBV而存在和复制。现知还有己型和庚型肝炎。肝炎病毒标志物属感染免疫学范畴，由于它在我国具有特殊的意义，故专列本节叙述。 一、 甲型肝炎病毒标志物检测 （一） 甲型肝炎病毒抗原和RNA测定 （二） 甲型肝炎病毒抗体测定 二、 乙型肝炎病毒标志物检测 （一）乙型肝炎病毒表面抗原测定　　乙型肝炎病毒表面抗原（hepatitis B virus surface antigen, HBsAg）系HBV中Dane颗粒外层的脂蛋白囊膜。它的基因位于HBV双链DNA的S区。前S1、前S2和S蛋白均为HBsAg的组成成分。 （