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* 发酵工艺 发酵时间:在菌丝自溶前必须放罐,否则过滤困难。 搅拌速度、通气量,接种比例影响微生物的生长特性。低接种量,高搅拌速度有利于生成块状和丸团沉淀。 * * 改善过滤性能的方法 若难过滤的发酵液,设法改善过滤性能,降低γB,提高过滤速度。 方法: 等电点法; 蛋白质变性法; 吸附法; 凝聚及絮凝法; 加入助滤剂; 酶解作用。 * 加入助滤剂: 助滤剂:不可压缩的多孔微粒,不吸附或很少吸附生化物质,使滤饼疏松,有利于过滤。 种类:硅酸盐粉末,纸浆,珠光岩,珍珠岩(SiO2) 助滤剂的加入有两种方法: 在滤布上预先铺一层助滤剂(1~2mm),该方法,会使滤速降低,但滤液透明度。 直接加入发酵液中。 * 加入酶 发酵液中有不溶性的多糖存在,则最好用酶将它转化为单糖,以提高过滤速度。 如:万古霉素发酵液,加0.0025%的细菌淀粉酶,搅拌0.5hr,2.5%硅藻土助滤剂,υ↑5倍。 发酵液染菌的处理:升高温度,增加催化剂用量,加助滤剂。 * 固—液分离设备的选择 常用于发酵液的分离设备有: 板框压滤机 鼓式真空过滤机 离心沉降分离机 * 板框压滤机 优点: 板框压滤机的过滤面积大; 过滤推动力(压力差)能较大幅度地进行调整,并能耐受较高的压力差; 结构简单,价格低, 动力消耗少等优点。 缺点 不能连续操作,设备笨重,劳动强度大, 卫生条件差, 非生产的辅助时间长,阻碍了过滤效率的提高。 * 鼓式真空过滤机 优点 能连续操作, 能实现自动化控制 缺点 压差较小,主要适用于霉菌发酵液的过滤。 * 离心分离 优点 分离速度快,效率高, 操作时卫生条件好等优点, 适合于大规模的分离过程。 缺点 投资费用高, 能耗较大。 * 碟式分离机可以完成两种操作: 液-固分离:即低浓度悬浮液的分离,称澄清操作; 液-液(或液-液-固)分离: 即乳浊液的分离,称分离操作。 碟式离心机 * 查找 絮凝剂的应用离子以及最新进展。 板框压滤机的过滤面积大,过滤推动力(压力差)能较大幅度地进行调整,并能耐受较高的压力差,故对不同过滤特性的发酵液适应性强,同时还具有结构简单,价格低,动力消耗少等优点,因此,目前,国内广泛被采用。但是,这种设备不能连续操作,设备笨重,劳动强度大,卫生条件差,非生产的辅助时间长(包括卸框、卸饼、洗滤饼,洗滤布,重新压紧板框等),阻碍了过滤效率的提高。自动板框过滤机是一种较新型的压滤设备,它使板框的拆装,滤渣的脱落卸出和滤布的清洗等操作都能自动进行,大大缩短了非生产的辅助时间和减轻了劳动强度。对于菌体较细小,粘度较大的发酵液,可加入助滤剂或采用絮凝等方法预处理后进行压滤。对于难过滤的枯草杆菌发酵液,可设计一种特别薄的板框以减小滤饼的阻力。另外,也可采用带有橡皮隔膜的压滤机,过滤结束时,在滤板和橡皮膜之间通入压缩空气来压榨滤饼,将液体挤压出来。 鼓式真空过滤机能连续操作,并能实现自动化控制,但是压差较小,主要适用于霉菌发酵液的过滤。例如,过滤青霉素发酵液的速度可达800L/(m2.h)。而对菌体较细或粘稠的发酵液不太适用。一种较好的解决办法是过滤前在转鼓面上预铺一层助滤剂,操作时,用一把缓慢向鼓面移动的刮刀将滤饼连同极薄的一层助滤剂一起刮去,这样使过滤面积不断更新,以维持正常的过滤速度。放线菌发酵液可采用这种方式过滤。 * 第十章 发酵液预处理和液相非均一体系分离技术 * 14 发酵液预处理和固液分离 技术手段 沉降 离心 凝聚 絮凝 过滤 固液分离 其它手段 * 凝聚:在中性盐作用下,由于双电层排斥电位的降低,而使胶体体系不稳定的现象。 絮凝:在高分子絮凝剂存在下,基于架桥作用,使胶粒形成粗大絮凝团的过程,是以物理集合为主的过程。 * * 几个名词: stern层:相距胶核表面约一个离子半径的平面。 滑移(动)面:当胶粒在溶液中作相对运动时,总有一薄层液体,随着它一起滑移,这一薄层,厚度比吸附层稍大。 φs:胶核表面的电位 φd:stern平面上的电位 ξ:滑移面上的电位,可测定,控制胶粒间电排斥作用的电位,表征双电层的特征 * 扩散层的有效厚度, 即stern面上的电位φ降 低到其值为1/e处的距离 ,不能直接测定。 水的介电常数 胶体的电动电荷密度 即滑移面电荷密度 * 若溶液中存在i离子: 结论:对带负电荷的发酵液,zi↑→δ↓→ξ↓,当双电层的排斥力不足以抗衡胶粒间的范德华引力时,由于热运动的结果导致胶粒的互相碰撞而聚集。 D/K/N/T都为常数 * 凝聚价(凝聚值) ①定义:胶粒发生凝聚作用的最小电解质浓度(毫摩尔/升)。 ②规律性:阳离子对带负电荷
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