多克隆抗体纯化-、解读.pptVIP

指导老师：陈忠正 副教授 汇报人：张晶晶 汇报内容 抗体技术的简介 多克隆抗体纯化的研究及应用 一 二 三 实验思考 一、抗体技术的简介 3 多克隆抗体的纯化技术 基因的原核表达及抗体的制备 2 抗体制备技术的发展阶段 1 1. 抗体制备技术的发展阶段： 抗体：B细胞分泌的能够特异性结合抗原的免疫球蛋白。 1890年Behring等发现抗白喉毒素抗体，开始了以抗原免疫动物来获得多克隆抗体(Pabs) 的途径 1975年 kohler等创建杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb) 1984年 Morrison 以基因工程方法制备基因工程抗体（GEAb） [1]甘丽晶,刘晓波,胡质毅.抗体分离纯化技术研究进展[J].检验医学与临床,2013,04:461-464. 2. 基因的原核表达及抗体的制备： 1. 盐析法 3. 多克隆抗体的纯化技术： 高浓度的中性盐，夺取抗体分子的水化层； 改变了溶液离子强度，中和抗体表面大量电荷。 中性盐有： 硫酸铵、 硫酸钠、 硫酸镁、 氯化钠及磷酸盐等。 2. 辛酸 -硫酸铵法 酸性条件（pH4.5） 往血清中加入短链脂肪酸 － 辛酸，血浆蛋白中的清蛋白、α 及 β－球蛋白成分沉淀， 取 抗体成分为主的上清液， 再经硫酸铵沉淀。 3. 亲和层析法 根据分子的特定结构部位能够同其他分子相互识别并结合的原理。 如酶与