液相色谱手物质分离工作总结.pptVIP

手性分析工作总结 2010.09.10 朱万夏 一.手性现象的介绍 二.仪器手性拆分方式 三.液相手性柱分析方法开发流程 四.工作中的一些实例讨论 一.手性现象的介绍 概念： 问:什么是手性？ 答:分子组成与构造完全相同但分子的立体结构不同的化合物,他们不能完全叠合却互为镜像,(如左手与右手),这种特性就叫手性(chirality)。而这两个互为物体与镜像关系的立体异构体,称为对映异构体 (enantiomers)。等量对映体的混合物，其旋光性相互抵消，没有旋光能力，称为外消旋体。 手性分子的研究历史 1801年 Hauy发现水晶晶体显示半面现象。 1809年 Malus观察到水晶晶体引起的偏光效应。 1812年 Biot发现了水晶片的旋光性 1815年 Biot将研究延伸到有机物及其溶液，发现除石英外樟脑、柠檬油、 松节油等酒精溶液以及蔗糖、酒石酸水溶液剂许多液体有机化合物 具有旋光性。 1848年 Pasteur在28岁时，研究酒石酸钠时发现有两种晶体。他在放大镜下 根据晶形的不同用镊子将其分成两份，配制成溶液测旋光，发现一 左旋、一右旋。又从结构上推想和分子结构的不对称联系起来，认 为一物一像。（历史上第一个手性拆分实验） 1874年 J.H. van’t Hoff提出C四面体学说，记为： 如果一个C上连有四个不同基因，在空间有两种排列，表示有二  种不同的构型。二种构型之间为物象关系：外形相似，但不能重 合。 不对称C原子数目（n）与立体异构体数之间的关系为2n 1966年 Lngold和V.Prelog分析讨论了旋光性与分子结构间的关系，建议将 分子本身与其镜像不能重合的分子，定义为手性分子。 如何判断： 分子的手性与处于手性部分的一个或一个以上的特定原子有关，使分子具有手性的几何因素有手性中心、手性轴和手性面。 手性中心：能引起分子具有手性的一个原子或者分子骨架的 中心，最常见的是手性碳；值得注意的是：多价杂原子 B,N,P,S等也可形成手性中心。 手性轴：分子中若干原子组成轴状结构，因分子中的一些原子或基团在此轴周围的空间排列不同而产生手性。 手性面：分子的手性由于某些基团对分子中的某一平面的不同分布而引起。 对映异构体特性: 物理化学性质上： 具备相同 的熔沸点,溶解度，紫外，红外，核磁，质谱等,仅旋光方向相反。 鉴别：XRD,XRPD 生物活性上： 可能有着巨大差异。 手性拆分在其他领域的应用： 农用化学 化妆品、香水、香料 营养品(人和动物) 光学材料（如光电子用手性液晶） 二.仪器手性拆分方式 常用的仪器分离手性化合物的技术 高效液相色谱 (HPLC) 气相色谱 (GC) (样品需具有一定的挥发性及热稳定性） 毛细管电泳(HPCE) 超临界流体色谱（SFC) 薄层色谱（TLC，定性） HPLC分离方式： 直接法（CMPA、CSP）： 手性固定相法 是由具有光学活性的单体，固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相，通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异，从而达到光学异构体拆分的目的。 手性流动相添加剂法： 流动相中加入手性添加剂，在普通固定相上吸附，形成短暂的手性环 境并对对映异构体间进行手性识别而达到分离。（环糊精，万古霉 素，手性金属配合剂等） 间接法（CDR）： 手性试剂衍生法： 流动相对映体混合物在预处理中进行柱前衍生组成一对非对映体(Diastereoisomers)，依其理化性质的差异，在非手性柱上得以分离。常用的衍生试剂：异硫氰酸脂类，酰氯类等 手性色谱柱拆分机理1 Dalgliesh: 要实现手性识别，手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用,并且其中至少有一种作用具有立体选择性。 Dalgliesh三点作用模型 手性分离效果是多种相互作用共同作用的结果。这些相互作用通过影响包埋复合物的形成，特殊位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。由于这种作用力较微弱，因此需要仔细调节、优化流动相和