2016-2017届高中生物第1章无菌操作技术实践微专题突破苏教版选修1.docVIP

微专题突破无菌操作技术实践 一、微生物的分离与鉴定 微生物的分离方法有很多种，本专题中常用的是：平板划线法、涂抹平板法、微生物的选择培养等。针对不同微生物的特点选择不同的方法，对目的微生物进行筛选。以下是尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与鉴定比较。 项目 尿素分解菌的分离与鉴定 纤维素分解菌的分离与鉴定 分离选 择条件 利用尿素为唯一氮源 利用纤维素为唯一碳源 鉴定 方法 培养基中加入酚红指示剂，变红色 在以纤维素为唯一碳源的培养基上，利用刚果红染色法，出现透明圈 鉴定 原理 细菌等微生物合成脲酶，将尿素分解产生NH3，使pH升高，加入酚红变红色 分解纤维素的微生物产生纤维素酶，将纤维素分解为纤维二糖或葡萄糖，使纤维素—刚果红复合物降解而出现透明圈 步骤 土壤取样→制备培养基→样品梯度稀释→涂布平板→培养观察→进一步鉴定 土壤取样→制备培养基→选择培养→富集培养→梯度稀释→涂布培养→刚果红染色法→挑取菌落→进一步鉴定 二、纯化细菌的方法 1．倒平板与涂布平板法的操作 (1)倒平板操作 (2)涂布平板操作 2．两种纯化细菌的方法比较 项目 优点 缺点 适用范围 平板划 线法 可以观察菌落特征，对混合菌进行分离 不能计数 适用于 好氧菌 稀释涂 布平板 法 可以计数，可以观察菌落特征 吸收量较少，较麻烦，平板不干燥，效果不好，容易蔓延 适用于 厌氧菌 和兼性 厌氧菌