加藤厚涂片法检测技术标准.doc

ICS11.020 C 61 WS、 中华人民共和国卫生行业标准 WS/T XXXX—XXXX 肠道蠕虫检测 改良加藤厚涂片法 intestinal?helminth?detection?modified?katos?thick?smear (征求意见稿) XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - XX实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准起草单位：本标准主要起草人： 本标准规定改良加藤厚涂片检测技术的操作流程。 本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对人体粪便内蠕虫卵的检测。 规范性引用文件 无 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。modified katos thick smear）： 指通过定量板取样，利用甘油和亲水玻璃纸对粪样进行透明的一种粪便中蠕虫卵的定量检测方法。 3.2 每克粪便虫卵数（eggs per gram，EPG）： 改良加藤厚涂片法中用来表示粪便中虫卵数量的指标。改良加藤厚涂片检测结果中用来反映感染强度的指标。 仪器设备 光学显微镜（100×400×） 蒸馏水100ml、纯甘油100ml、3%孔雀绿（或亚甲基蓝）1ml配制而成。 材料 5.2.1 塑料定量板：规格为30mm×40mm×1mm，中央孔为圆台形，其短径3mm，长径4mm，高1mm，容积为38.75mm3 5.2.2 刮棒：长60mm，宽6mm，厚2mm。 5.2.3 尼龙绢：80目，即每英寸（25.4mm）长度内的筛孔数目为80。 5.2.4 亲水性透明玻璃纸：厚40μm，裁剪成25mm×40mm大小。 5.2.5 载玻片：长76.2mm ×宽25.4mm×厚1mm。 检测步骤 样本采集 检测样本为新鲜的粪便。受检者自行采集鸡蛋大小的新鲜粪便，存放于敞口有盖防水坚固的密闭容器内，将标有统一有效样本信息（姓名、编号、送检日期）的标签纸贴于容器的外部。采集后的样本在24h内送检，未及时检测的样本应置于4℃保存。 样本检测 6.2.1 取一张洁净的载玻片，用记号笔在一端标注样本编号。将定量板放在载玻片中部将尼龙绢(cm×8cm)平放在粪便上，用刮尼龙绢上方刮取粪。 将通过尼龙绢刮出的粪样填入定量板的中央孔中，填满刮平。 定量板，粪便就留在载玻片上。 取一张浸泡透明液的亲水玻璃纸，抖掉多余的浸泡液后，盖在粪便上。另一块载玻片轻压，使粪便均匀展开至玻边缘 6.2.6 用拇指固定亲水玻璃纸，将用来压粪样的载玻片轻轻平移取下，制好的加藤片放置在室温下透明。 6.2.7 粪膜透明后应及时镜检，若透明过度，薄壳虫卵易变形看不清楚，造成漏检或误判。25℃、75湿度下片放置不宜超过2小时空气湿度大放置时间可适当延长。 大小 形状 颜色 卵盖 卵壳 内容物 其他 模式图 华支睾吸虫卵 （27~35）μm×（12~20）μm 形似芝麻，一端较窄 淡黄褐色 有 卵盖周围的卵壳增厚形成肩峰 毛蚴 一端有小疣 布氏姜片吸虫卵 （130~140）μm×（80~85）μm 椭圆形 淡黄色 一端有不明显小盖 薄而均匀 近卵盖端有1个为未分裂卵细胞，周围约20~40个卵黄细胞 人体最大蠕虫卵 卫氏并殖吸虫卵 （80~118）μm×（48~60）μm 椭圆形，左右多不对称，前端较宽，后端稍窄。 金黄色 有扁平卵盖 厚薄不均，后端往往增厚 虫卵顶端有一半透明卵细胞及10~20个卵黄细胞及许多颗粒 / 斯氏狸殖吸虫卵 82.7μm×48.4μm 椭圆形，较对称， 　 　 　 　 日本血吸虫卵 89μm×67μm 略呈椭圆形 淡黄色 无 厚薄均匀 内含一成熟的毛蚴，毛蚴和卵壳间常可见到大小不等的圆形或椭圆形的油滴状毛蚴分泌物 卵壳一侧有一逗点状小棘 肝片形吸虫 （130~150）μm×（63~90）μm 椭圆形 淡黄褐色 一端有一小盖 薄，分两层 卵细胞和卵黄细胞 虫卵较大 异型科吸虫 （19~39）μm×（11~20）μm 形似芝麻，一端较窄 黄褐色 有卵盖 卵壳较薄 内含成熟毛蚴 虫卵小，与华支睾吸虫卵相似 棘口科吸虫 （80~140）μm×（40~90）μm 椭圆形 淡黄色 一端有一小盖 卵壳薄 内含未分化的卵细胞核若干个卵黄细胞 虫卵较大 曼氏迭宫绦虫卵 （52~76）μm×（31~44）μm 椭圆形 浅灰褐色 有 较薄 一个卵细胞和若干个卵黄细胞 　 阔节裂头绦虫卵 （55~76）μm×宽（41~56）μm， 卵圆形 浅灰褐色 一端有明显 卵盖 较厚 卵内胚胎已开始发育 另一端有一小棘 猪带绦虫卵 直径