细胞的基本知识-中国显微图像网.ppt

第三章 细胞生物学研究方法 1.1 光学显微镜 1.1.1普通光学显微镜 D＝0.61?÷N·A N·A＝n·sin(?/2) n：折射率 D：分辨率 N·A：镜口率。低倍镜0.28，高倍镜0.65，油镜1.25. 可见光：?＝400～760 nm, 一般显微镜放大倍数在1000～1500倍，分辨率0.2?m. 紫外光：?＝390～130 电子束：100V,?＝1.23； 10,000V, ?＝0.122；100,000V ?＝0.0387 1.1.2紫外线显微镜 波长短于400nm, 分辨率提高一倍。 可观察细胞内具有紫外线吸收能力的物质如核酸（260nm）、蛋白质(280nm). 镜片石英玻璃，价格昂贵。 1.1.2荧光显微镜 叶绿体在紫外线照射后发出荧光。 可加荧光染料如酸性品红、 啶橙，中性红、甲基绿。 1.2 电子显微镜 1.2.2透射电镜制样 观察样品的内部结构。 样品常规制备：样品切成小块（１立方毫米）。 １～5％戊二醛固定１小时以上，清洗，１％锇酸固定１小时，清洗。