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万方数据
摘 要
鸡白痢沙门氏菌 （Salmonellapullorum，S.pullorum）是危害养鸡业最严重的
AvBD6
肠道细菌之一，尤其对雏鸡的危害最为严重。 β-防御素6 （ ）高表达
于消化道，并具有广泛的抗微生物活性。鸡Toll样受体（ChTLR15）可以识别
沙门氏菌,诱导机体自身免疫，且ChTLR15 同任何已知脊椎动物的TLR都不同，
是鸡所特有的受体。
本研究开展在抗鸡白痢沙门氏菌感染过程中AvBD6和ChTLR15的天然免疫
调控机制方面的研究。本试验用鸡白痢沙门氏菌感染14 日龄的雏鸡，建立鸡白
痢沙门氏菌感染模型，观察其病理变化。采集雏鸡感染后不同时间点的小肠组织，
利用实时荧光定量RT-PCR检测AvBD6和ChTLR15在小肠组织内mRNA 的转
录水平，原位杂交方法结合激光共聚焦显微镜来检测AvBD6和ChTLR15mRNA
在小肠组织内的分布规律，具体研究内容和结果如下：
1、罗曼雏鸡感染鸡白痢沙门氏菌及病理变化
经口接种配制好的浓度为1×10 CFU/mL鸡白痢沙门氏菌菌液0.5mL/只，9
0.5mL/ PBS
对照组接种 只 ，感染后观察雏鸡的病理变化。结果显示，鸡白痢沙
门氏菌可以引起罗曼雏鸡的脾脏，肝脏，心脏和肠道等出现明显的病理组织学变
化。肝脏肿大且肝脏表面有白色坏死点，心脏上有白色结节，小肠、直肠有出血
点。小肠绒毛受损甚至脱落,肠绒毛中心轴出现较多的红细胞，炎性细胞增多，
柱状上皮细胞脱落。
2、AvBD6和ChTLR15在感染雏鸡小肠组织中的mRNA转录水平
14 48h 0h 6h 12h
日龄的罗曼雏鸡接种鸡白痢沙门氏菌，于感染 内（ ， ， ，
24h，36和48h）分别采集十二指肠、空肠和回肠组织，应用实时荧光定量PCR
检测AvBD6和ChTLR15基因在感染过程中的表达。结果显示雏鸡感染鸡白痢沙
AvBD6 ChTLR15
门氏菌后， 和 在各肠段组织中均有表达，其中在十二指肠相对
表达量最高，在0h-24h 内呈上升趋势，24h-48h相对表达量呈下降趋势，在
24h 的表达量极显著高于0h(P0.01)，且AvBD6在24h 的表达量显著高于12
h(P0.05) AvBD6 ChTLR15mRNA
。在同一时间段 和 在十二指肠的转录水平显
著高于回肠(P0.05)，与空肠相比，差异不显著(P0.05)，且回肠和空肠相比差
异不显著(P0.05)。但在相同条件下，AvBD6 和ChTLR15mRNA的转录水平差
异不显著(P0.05)。
3、AvBD6和ChTLR15基因在感染雏鸡小肠组织中的原位表达
根据荧光定量PCR 的结果，于感染24h时采集十二指肠、空肠和回肠组织，
24h AvBD6 ChTLR15
利用原位杂交技术来检测雏鸡在感染鸡白痢沙门氏菌 时 和
在肠道中的原位表达情况。结果显示，AvBD6和ChTLR15mRNA 在小肠内均
I
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