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第十章　吸光光度法 1．掌握吸光光度法的原理，理解朗伯-比耳定律是吸光光度法的定量依据并掌握朗伯-比耳定律的数学表达式及其意义，正确理解摩尔吸光系数的意义及单位，并会有关计算。 2.掌握互补色光的原理和影响朗伯-比耳定律偏离的因素。掌握吸收曲线在吸光光度分析中的作用。 3.了解各种吸光光度法的原理、特点、区别及应用，掌握标准曲线的制作方法，并能根据标准曲线(工作曲线)计算分析结果。 4.了解吸光光度法仪器的主要部件，正确掌握吸光光度法仪器的操作. 5.掌握吸光光度法测量条件的选择和仪器的测量误差。 6.了解显色反应，掌握显色反应的要求和显色反应条件。 7.了解吸光光度法的应用，掌握单一组分的测量方法。 化学分析与仪器分析方法比较： 化学分析：常量组分(1%), Er 0.1%～0.2% 准确度高 依据化学反应, 使用玻璃仪器 仪器分析：微量组分(1%), Er 1%～5% 灵敏度高 依据物理或物理化学性质, 需要特殊的仪器 例: 含Fe约0.05%的样品, 称0.2g, 则m(Fe)≈0.1mg 重量法 m(Fe2O3)≈0.14mg, 称不准 容量法 V(K2Cr2O7)≈0.02mL, 测不准 光度法 结果0.048%～0.052%, 满足要求 概述： 一、定义： 基于被测物质的分子 对光 具有选择吸收的特性而建立的分析方法。 它包括比色法、可见分光光度法、紫外分光光度法及红外光谱法等。我们重点讨论溶液可见光区的吸光光度法(分光光度法，光度法)。 二、特点： (1) 灵敏度高：10-5~10-6 mol/L (2) 准确度高：比色分析，相对误差5~10%,分光光度法，2~5%，1~2% (3) 应用广泛：测多数无机物和许多有机物 (4) 操作简便仪器设备易普及 §10.1 物质对光的选择性吸收和光吸收的基本定律 一、物质对光的选择性吸收 1.光的基本性质: 电磁波的波粒二象性 （1）波动性: 光的传播速度: c－真空中光速 2108m/s ~3.0 ×108m/s λ－波长，单位：m,cm,mm,(m,nm,? 1(m=10-6m, 1nm=10-9m, 1?=10-10m ν－频率，单位：赫玆（周）Hz 次/秒 n－折射率，真空中为1 （2）微粒性 光量子，具有能量： h－普朗克(Planck)常数 6.626×10-34J·s (－频率 E－光量子具有的能量 单位：J(焦耳)，eV(电子伏特) 结论: 一定波长的光具有一定的能量，波长越长(频率越低)，光量子的能量越低。 2、电磁波谱：电磁辐射按波长顺序排列 光谱名称 波长范围 X射线 0.1~10nm 远紫外光 10~200nm 近紫外光 200~400nm 可见光 400~750nm 近红外光 0.75~2.5um 中红外光 2.5~5.0um 远红外光 5.0~1000um 微波 0.1~100cm 无线电波 1～1000m 3. 单色光、复合光、光的互补 单色光：单一波长的光 复合光：由不同波长的光组合而成的光 光的互补：若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光，那么就称这两种单色光为互补色光，这种现象称为光的互补。 4、物质对光产生选择性吸收的原理 如果我们把具有不同颜色的各种物体放置在黑暗处，则什么颜色也看不到。可见物质呈现的颜色与光有着密切的关系，一种物质呈现何种颜色，是与光的组成和物质本身的结构有关的。 对溶液来说，溶液呈现不同的颜色，是由于溶液中的质点(分子或离子)选择性的吸收某种颜色的光所引起的。如果各种颜色的光透过程度相同，这种物质就是无色透明的。如果只让一部分波长的光透过，其他波长的光被吸收，则溶液就呈现出透过光的颜色，也就是溶液呈现的是与它吸收的光成互补色的颜色。例如硫酸铜溶液因吸收了白光中的黄色光而呈蓝色；高锰酸钾溶液因吸收了白光中的绿色光而呈现紫色。 （1）、物质的颜色与吸收光的关系 （2）、光谱种类 A、原子光谱：吸收、发射、荧光 B、分子光谱：紫外、可见、红外等吸收光谱 C、黑体辐射：白炽灯、液、固灼热发光 吸收光谱 (3)物质对光的选择吸收 物质的电子结构不同，所能吸收光的波长也不同，这就是物质对光选择吸收的原因。 例：A 物质 1 ev = 1.6(10-19 J. B 物质 同理，得： （4）吸收光谱的获得 吸收光谱曲线：物质在不同波长下吸收光的强度大小 A～λ关系 最大吸收波长λmax：光吸收最大处的波长 对比度(Δλ):络合物最大吸收波长(λMRmax)与试剂最大吸收波长(λR