乙肝表面抗原及乙肝两对半检测1精要.ppt

乙肝表面抗原及乙肝两对半检测 主要内容 检测的方法及原理 检测方法及原理 检测方法及原理 检测方法及原理 检测方法及原理 检测原理 检测方法及原理 检测方法及原理 检测方法及原理 检测方法及原理 方法步骤 结果判断及临床意义 一、结果判断 结果判断 结果判断 结果判断 结果判断 二、临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 临床意义 三、注意事项 注意事项 注意事项 注意事项 注意事项 注意事项 一、何谓PreS1Ag？ PreS1Ag是乙型肝炎病毒基因组前S1区编码的前蛋白，具有很强的免疫原性，是病毒表面抗原(HBsAg)的组成成分。它只存在于具有传染性的完整的乙肝病毒颗粒上，是黏附和侵袭人体肝细胞的主要因子。 二、检测PreS1Ag的意义 1. PreS1Ag的检测能够弥补乙肝五项检测的不足 ①PreS1Ag出现在急性乙肝感染的最早期，在转氨酶升高前，即可查出，是早期诊断乙肝病毒感染的标志。 ②急性乙肝PreS1Ag转阴越早，预后越好，提示病毒清除和病情好转。反之，PreS1Ag持续阳性，则提示将发展成慢性肝炎。 ③抗HBe(＋)慢性乙肝约占慢肝的30%—50%，检测PreS1Ag(＋)，提示病毒在机体内继续复制，具有传染性，患者容易演变为肝硬化或肝癌。加查PreS1Ag，弥补了因HBeAg的缺失造成的诊治困难。 ④在乙肝无症状携带者中，有一定比例HBeAb(＋)者，如果PreS1Ag(＋)可反映出病毒并没有被清除，在体内复制仍然活跃，肝脏存在潜在的病理损伤。 ⑤抗病毒治疗，检测PreS1Ag可作为治疗前的患者筛查(适应症)和治疗后的疗效判断。 2. PreS1Ag检测能够加强HBV—DNA检测的作用 ①因病毒基因变异的影响，个别病毒变异株感染的患者HBV—DNA检测为阴性，PreS1Ag的检测可以防止漏检，并提示可能存在病毒变异迹象。 ②PreS1Ag是免疫测定技术，具有快速、直接、简便的特点。PreS1Ag的检测与HBV—DNA检测在乙肝的诊断方面相互补充和加强，就像HBV—DNA不能替代乙肝五项的检测一样，同样HBV—DNA不能替代PreS1Ag的检测。 三、何谓PreS1Ab？ 是HBV的中和抗体，能阻止HBV侵入肝细胞，抗-PreS1Ab在急性期和恢复早期出现，预示病毒正在或已被清除，疾病预后良好。乙型肝炎病毒 前S1抗体 可作为急性乙型肝炎临床预后早期诊断的血清学指标。 　 四、PreS1Ab意义： 1．前S1抗体是急性 HBV 感染最早期出现的抗体比 HBsAb 和抗 HBcIgM 出现早，起到了临床预后早期诊断的作用。前S1抗体出现提示预后良好。前S1抗体参与病毒的清除，前S1抗原/抗体的反转预示疾病将进入恢复期，急性乙型肝炎患者前S1抗原阴转越早，前S1抗体阳转越早预后越好。 　　2．对慢性乙型肝炎患者长期动态、随访 出现血清前S1抗体阳性者，HBVDNA阴转率显著增高或 HBVDNA 含量显著下降，预示疾病恢复良好。 　　3．乙型肝炎病毒 前S1抗体 可作为临床抗病毒疗效疾病预后的血清学指标。 　　4．总之，乙型肝炎患者前S1抗体出现与否，与病程的进展以及预后有较密切的关联。前S1抗体的检测对乙肝的诊断及治疗有较为重要的临床意义。 1 标本采集与处理的影响 标本收集后应尽快分离出血清或血浆以避免溶血。检测时应尽量使用新鲜的标本。标本若不能及时送检，可在2℃-8℃冷藏3天。长期保存需冷冻于-20℃，忌反复冻融。 标本严重溶血及混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样的活性，催化底物显色造成假阳性。 标本凝固不全 ，正常血液采集后1/2-2h开始凝固，18-24h血块完全收缩。在工作中，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；因此血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。 2 试剂影响 因各厂家对检测标本要求、操作步骤不同，故认真阅读检测试剂说明书能避免不必要的实验误差（特别是胶体金免疫法）。不同厂家生产的试剂灵敏度与特异性存在一定的差别，不同厂家试剂的特异性和敏感性分别为89.4%-99.3%、78-89%,存在较大差异。有的厂家酶标板孔间A值差大于15%；标记酶的活性及