动物实验基本操作技术总汇.pptVIP

实验动物的抓取与固定 性别鉴定 年龄的大致判断 妊娠检查 分组与编号 一、大、小鼠的抓取固定 二、豚鼠的抓取固定法 三、家兔的抓取固定法 一、大、小鼠的性别鉴定 一、大、小鼠 1. 根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样） 2. 根据体重鉴定日龄 ⑴ 小鼠日龄与体重的对应 二、豚鼠 一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据体重来推断大致年龄。同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。 外部检查法 摸胎法 阴道检查法 直肠检查法 超声波检查法 孕酮含量测定法 以3除各随机数字，若余数为l，即该鼠归A组；余数为2，归人B组；余数为3，归入C组。结果A组为4只，B组为3只，C组为5只。C组多一只应调入B组。方法同上。仍采用随机方法；从10后面接着抄，为61。除以5，余数为1，则将第一个C，即第2号鼠调入B组。调整后各组鼠的编号如下： 组别 鼠的编号 A组 3 9 10 12 B组 l 2 4 6 C组 5 7 8 11 对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致 二、编号标记方法 实验动物分组后，为了区分、观察并记录每个个体的反应情况，必须给每只动物进行编号标记。 1．体表颜料着色法 一般对短期试验的白色动物可用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有： 红色：0.5％中性红或品红溶液； 黄色：3％～5％苦味酸溶液或80％～90％苦味酸酒精饱和液； 咖啡色：2％硝酸银溶液； 黑色：煤焦油酒精溶液。 左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6， 2．个体耳号标记法 3. 个体断趾标记法 4. 耳号钳标记法 5. 挂牌法 采血方法的选择，决定于实验目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及 K+、Na+、Cl-离子浓度，必须采取动脉血液。 采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜； 采血用具有采用部位一般需要进行消毒； 采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥； 若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。 （一）皮下注射 注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有5（1/2）号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧，豚鼠在后大腿的内侧或小腹部；大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。 （二）皮内注射 皮内注射时需将注射的局部脱去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用结核菌素注射器连4(1/2)细针头，紧贴皮肤表层刺入皮内，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射药液，此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。 （四）腹腔注射 用大、小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左（或右）下腹部刺入皮下，使针头向前推?0.5～1.0cm，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液， （五）静脉注射 1．兔：兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动脉，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不用。外缘静脉表浅易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。 2．小白鼠和大白鼠 一般采用尾静脉注射，操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中，使尾巴露出，尾部用45～50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张，并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指和小指夹住尾巴的末梢，右手持注射器连4(1/2)号细针头，使针头与静脉平行（小于30℃