生物医学研究中的纳米检测与纳米操控技术.pdfVIP

2伽6第五届中瞳(1l际)纳米科技西安研讨会谊文集 2006 ■■—■■——■量■篁宣萱置II I——■誊罩■墨置墨i—■■——■■——；————●●—●■——■—————●■—●●—■■———■■—_ 生物医学研究中的纳米检测与纳米操控技术 黄耀熊 i暨南大学生物医学工程研究所，广东广州510632) 生物纳米检测分析与操控技术揉台了纳米拄术与生命科学的研究及有关生物技术，对促进相关学科的发展具有重 要意义。本文介绍生物医学研究中的纳米检测与纳米操控技术，主要有； (1)纳米体系检测分析技术，包括动静态激光散射技术，显微纳米检测技术，以及它们在测定不同纳米体系在 其自然状态情况下的大小、形态结构、带电特性与粒度分布等特性参数中的应用，在溯定分析蛋臼、DN^及各种夫分 子的聚合与离解、相互作用等方面的应用。 (2)用于生物医学以及药物学研究的，在纳米尺度上、在亚细胞与分子水平上对细胞与生物大分子进行无扰、 实时、原位测定(包括参数测定与成像)的技术研究，以及以这些技术对有关活细胞其细胞整体、细胞膜与细胞器， 胞内分子的结构与功能随各种条件的变化进行铡定分析。本系列技术包括一显徽激光动态散射技术系统，一快速多道 显微分光光度分析系统，一宽场(明场)显微光切片系统，一基于细胞微环境技术的激光共焦拉曼散射显微扫描测定 与成像技术系统，一单细胞凝胶电泳图像分析技术系统，以及一快速荧光成像动态监测系统。不但可测定细胞与分子 的结构参数：包括细胞内及细胞膜上分子的化学结构、浓度、其流体力学半径与在细胞内的分布状态；蛋白分子与细 胞的三维立体结构形态、大小、形状、表面曲率和形状规化因子。还可测定有关功能参数包括细胞内分子的扩散传输 系数；蛋白的功能变化}红细胞内血红蛋白分子的携氧能力；细胞膜的变形能力、附着能力、张力、粘弹性与刚性； 细胞分化、细胞增殖、细胞DNA含量及DNA损伤的定量定位侧定等。并可在无扰、保持细胞自然状态下实施对单个活 细胞进行三维分子结构分布测定与成像，测定活细胞在有关生命过程中如细胞增值、分化及凋亡等过程的生物化学变 化，测定细胞内有关分子复合体的组成与相互作用，测定纳米体系(包括介导的药物与基因等)进入细胞的途径、其 在细胞的空间分布、所引起的生物效应作用与作用位点和作用机制等a (3)对各种生物纳米体系如生物大分子、蛋白以及细胞器与细胞等进行操控的技术。主要包括的技术手段是激 光剪、激光镊与原子力显微镜等，并介绍以这些技术实现对细胞、细胞器、染色体以至删A分子的搬运、组装、切割、 融合、焊接，改变DNA的序列与结构，引导形成新的遗传特性。并探求用于临床诊断与治疗的纳米操控手段。此外， 并介绍一结合激光剪技术、激光镊技术以及微管操控技术的细胞显微操控与细胞微环境形成技术系统，微米级生物反 应器的建立及其内纳米体系的分布与相互作用等。 以上所述大部分是我们自主发展起来的技术系统或在有关国际先进技术系统基础上发展起来的新技术。借助这些 技术，我们实现了对处于不同条件下各种纳米体系其自然构像的测定，指导有关纳米体系与器件的研究制备；对活细 胞在受到外部刺激时的瞬态反应及其分子结构的变化作即时监测；用于测定有关纳米体系包括所携带的药物对细胞的 即时作用和对其DNA与有关蛋白等分子的作用；蛋白分子的三维成像与功能团分割分析；生物大分子、染色体的操控 及微米级生物反应器的建立及对其内纳米体系的分布与相互作用研究等。本文也报道进行这些研究的有关具体技术方 法与结果。 ·12· 矽鲢趑