组织病理新技术的发展与应用.pdf

· 252 · 齐齐哈尔医学院学报 2013年第 34卷第2期 JournalofQiqiharUniversityofMedicine，2013，Vo1．34，No．2 ． 综 述 ·讲 座 ． 组织病理新技术的发展与应用 吕磊 摘【要】 随着现代生物医学技术的快速发展和广泛应用，许多新的组织病理技术和相关仪器不断涌 现，各学科之间相互渗透和影响，使病理学新的研究方法与技术层出不穷。这些新技术、新方法、新仪器的 应用极大提高了病理学研究水平和疾病诊断的准确性。本文简要介绍组织病理实验研究与临床诊断的一 些新方法和新技术。 【关键词】 免疫组化； 原位杂交； 多聚酶链式反应；显微切割；激光共聚焦； 比较基因组； 生物芯片 病理学是医学中一门重要的桥梁学科，有约300年的历 此外，全 自动免疫组化染色仪的使用可以提高标准化程度，减 史。在 18和 19世纪初，人们依赖肉眼和简单的放大镜观察 少手工操作染色带来的人为误差 J。从现有科技水平来看， 病变组织，产生 了器 官病理学。1843年，德 国病理学家 经过努力是完全可能建立起一套切实可行的定量免疫组化技 Virchow将显微镜用于观察病变部位组织细胞结构的改变 ，病 术，为当代个体化靶 向治疗 以及分子医学提供强有力的工 理学进入细胞病理学，随着切片技术和染色技术的发明，开创 且 [ 了组织病理学技术最基本 的组织制片和HE染色常规技术。 二、原位杂交技术 20世纪50年代出现了生物组织标本制备超薄切片技术 ，病 原位杂交 (insituhybridization，ISH)是应用标记的已知序 理学研究从细胞水平深入到亚细胞水平，由此产生了超微结 列核苷酸片段作为探针 ，通过杂交直接在组织切片、细胞涂片 构病理。半个多世纪以来 ，科学技术不断的进步 ，许多新知 或培养细胞爬片上检测和定位某一特定的靶DNA或 RNA的 识、新理论广泛应用于病理学各个领域。特别是近2O多年一 存在。该方法具有2个特点：1)基因水平的检测，即直接检测 系列相关新方法、新技术的相继建立以及细胞生物学、分子生 DNA或RNA；2)可以明确定位，在保存组织结构同时揭示组 物学、环境医学 、现代免疫学、现代遗传学等新兴学科迅速兴 织细胞的异质性，细胞基因表达的异质性和细胞器中的区别 起，对病理学科的发展产生了深远的影响，带来了新的理论和 定位 。原位杂交与免疫组织化学在具体实验操作中有许 技术…。 多相似之处。滕孝静等 将 自动免疫组化染色仪应用于 一 、 免疫组织(细胞)化学技术 EBER(EpsteinBarrencodedRNAs)原位杂交技术，得到了满 免疫组织化学 (immunohistochemistry，IHC)是利用抗原抗 意的染色效果。1986年使用荧光标记 DNA探针 ，开启了荧 体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 光原位杂交 (FISH)时代，与原位杂交技术相 比，FISH更加安 (荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原 全 、快速、特异性好、定位准确。目前已应用于外科病理学诊 (多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量研究 的一种技 断中，为乳腺癌 、肺癌、胃癌等实体肿瘤进行早期诊断、个性化 术方法。免疫组织化学技术不仅有较高的敏感性、特异性、简 治疗以及愈合判断。但FISH技术操作较为繁琐且实验结果 便性等优点 ，还能将形态学改变与功能、代谢变化相结合，基 较不稳定。陈顺平等 8j通过实践 ，提出在FISH实验中控制 因水平和蛋白质水平检测相结合，细胞水平和超微结构水平 酶消化的稳定以及判断细胞消化效果是对操作者必备要求 ， 相结合 j，因此 ，在所有新技术中，免疫组织化学技术是最重 合适的消化程度是实验的关键，也是提高杂交率和诊断准确 要和