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2-1—2“微生物的实验室培养”演示课件[选择修读1]
微生物的实验室培养 第二课时——纯化大肠杆菌 微生物实验室培养(知识点总结) 配制培养基 ①在火焰旁右手拿锥形瓶,左手拔出棉塞; ②右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰; ③左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上皿盖。 ④待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置。 平板划线接种 原理: 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操 作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面 。 平板划线接种 平板划线接种 稀释涂布平板接种 原理: 将菌液进行一系列梯度稀释,并将不同稀释度 菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。 当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成 的标准菌落。 稀释涂布平板接种 结果分析与评价 1、培养基制备成功的标准 菌种的保藏(了解) 1、临时保藏:适用于频繁使用的菌种。将菌种接种到固体斜面培养基,在适宜的温度下培养。当菌落长成后,将试管置于4℃的冰箱中保藏 2、甘油冷冻管保藏:适用于需长期保存的菌种。在3mL甘油瓶中,装入1mL甘油灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混匀,放-20℃的冷冻箱中保藏 纯化大肠杆菌(实验过程) * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 复习题 1、甲、乙、丙是三种微生物,下表①、②、③是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在③中正常生长繁殖;甲能在①中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在②中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是: ① ② ③ 粉状硫 10g + + + K2HPO4 4g + + + FeSO4 0.5g + + + 蔗糖 10g + - + (NH)2SO4 0.4g - + + H2O 100mL + + + MgSO4 9.25g + + + CaCI2 0.5g + + + A、甲乙丙都是异养微生物 B 、甲乙都是自养微生物、丙是异养微生物 C、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物 D、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 复习题 2、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是: ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A、⑤③②①④⑥ B、①②③④⑤⑥ C、⑥②③④①⑤ D、③④②①⑥⑤ Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 三、纯化大肠杆菌 实验目的:接种大肠杆菌于培养基上,经过培养使其形成由单个细胞繁殖形成的子细胞群体,即菌落。 实验过程:(知识网络) 配制培养基 接种大肠杆菌 恒温培养箱中培养(12—24h) 结果分析与评价 计算→ 称量→ 溶化→ 灭菌→ 倒平板 调PH → 分装 → 包扎 菌种保藏 平板划线 稀释涂布平板 未接种的培养(对照组) 接种的培养(实验组) 培养基配制成功与否? 接种操作成功与否? Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 倒平板过程总结: Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Q1.培养基高压蒸汽灭菌后,需冷却到____℃左右时,才能倒平板。用什么办法来估计培养基的温度?________________________________________________________
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