实验六血凝和血凝抑制试验讲述.pptVIP

用途: ①用于检测血清中抗体含量； ②鉴定病毒的型、亚型； 血凝抑制价：能完全抑制血球凝集的最高血清稀释度即为该血清的血凝抑制价 试验材料 4个血凝单位鸡新城疫病毒 鸡红细胞：同上 被检血清(采自被检鸡的血清) 灭菌0.85%生理盐水 96孔U型微量反应板、微量移液器、灭菌塑料吸头 操作步骤 在血凝板的1-12孔加入25UL生理盐水，最后2孔加50UL。 第1孔加入待检血清25UL，混匀后吸25UL至第2孔，倍比稀释直至第10孔，混匀后弃25UL。 在1-10孔，每孔加稀释好的25UL 4个血凝单位的病毒悬液，室温静置30分钟 将红细胞轻轻摇动混匀，在1-12孔中每孔加入50ΜL 手工震荡1MIN，在37℃静置30MIN(室温40分钟)后观察结果 判定结果：能将病毒凝集红细胞的作用完全抑制的血清的最高稀释倍数为该血清的红细胞凝集抑制效价，以2的指数表示。（上图抗体结果从上至下依次为：8/7/8/9/8/7/7/6 ） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 HA试验 HI试验 * 红细胞的来源：选择适宜动物的红细胞；红细胞的数量：只要沉淀后形成明显的小红点既可以；红细胞的储存：4度不要超过1周 * 红细胞的来源：选择适宜动物的红细胞；红细胞的数量：只要沉