检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质-观察DNA和RNA在细胞中的分布题稿.ppt

* 实验2：检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质 1．实验原理。 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如： 还原糖＋斐林试剂(50～65 ℃)\s\up7(水浴加热(水浴加热)砖红色沉淀； 脂肪＋ 蛋白质＋双缩脲试剂―→紫色。 2．实验流程。 (1)还原糖的检测和观察。 (2)脂肪的检测和观察。 方法一：花生种子匀浆＋3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色。 方法二： (3)蛋白质的检测。 ?特别提醒： (1)还原糖鉴定的实验材料要求。 ①浅色：不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰。 ②还原糖含量高：不能用马铃薯(富含淀粉)、甘蔗、甜菜(富含蔗糖)。 (2)唯一需要加热——还原糖鉴定，且必需水浴加热，不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。 (3)非还原糖(如蔗糖)＋斐林试剂水浴加热现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。 (4)唯一需要显微镜——脂肪鉴定，实验用50%酒精的作用——洗掉浮色。 (5)记准混合后加入——斐林试剂，且现配现用；分别加入——双缩脲试剂(先加A液，后加B液，且B液不能过量)。两者成分相同，但CuSO4溶液的浓度不同，所以不能混用。 (6)若用大豆作材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其黏在试管壁上不易涮洗；且该实验应预留部分组织样液作对比。 (7)易写错别字提示：“斐林试剂”中的“斐”不可错写成“非”，双缩脲试剂中“脲”不可错写成“尿”。 3．斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析。 B液CuSO4浓度为0.01 g/mL 紫色 具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2＋反应生成络合物 不需加热即可反应 使用时先加A液再加B液 双缩脲试剂 都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用NaOH浓度都是0.1 g/mL 相同点 乙液CuSO4浓度为0.05 g/mL 浓度 砖红色 颜色 还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原为Cu2O 反应 原理 需水浴加热 颜色反 应条件 甲液和乙液等量混合均匀后方可使用，且现配现用 不同点 使用 方法 斐林试剂 比较项目 课题2：鉴定类实验 1．某些特定化学物质的检测方法。 含糖量高的白色或近白色 植物材料、糖尿病患者尿液 需要 砖红色沉淀 检测、鉴定还原糖 斐林试剂 脱色的叶片 不需要 淀粉遇碘变蓝 检测、鉴定淀粉 碘液 生物材料 水浴加热 现象 作用 鉴定类实验常用的试剂或指标物 酵母菌 不需要 蓝→绿→黄 检测、鉴定CO2 溴麝香草酚蓝水溶液 酵母菌 不需要 橙色酸性条件灰绿色 检测、鉴定酒精 重铬酸钾溶液 新鲜的绿色叶子 形成四条色素带 提取、分离色素 无水乙醇、层析液 花生种子 不需要 橘黄色/红色 检测、鉴定脂肪 苏丹Ⅲ/Ⅳ染液 豆浆(植物蛋白)、蛋清(动物蛋白) 不需要 紫色 检测、鉴定蛋白质 双缩脲试剂 根尖分生区细胞 不需要 紫/红 检测、鉴定染色体 龙胆紫溶液或醋酸洋红液 鸡血细胞 需要 蓝色 检测、鉴定DNA 二苯胺 动物肝脏或马铃薯切片 O2使余烬木条复燃 检测、鉴定O2 余烬木条 酵母菌 不需要 CO2使Ca(OH)2溶液变浑浊 检测、鉴定CO2 Ca(OH)2溶液 2.实验拓展延伸。 （1）物质鉴定 无需提取直接鉴定(还原糖等)→加试剂产生特定颜色变化进行鉴定,提取后再鉴定(色素等)→层析法分离鉴定 （2）定量检测指标 实验3：观察DNA和RNA在细胞中的分布 1．实验原理。 甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同：DNA 绿色；RNA 红色 2．实验流程。 甲基氯 呲罗红 取口腔上皮 细胞制片 冲洗涂片　用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10 s 观察 ?特别提醒： 观察DNA和RNA在细胞分布实验中的4个注意问题 (1)选材：口腔上皮细胞、无色的洋葱鳞片叶内表皮细胞，不能用紫色洋葱表皮细胞或叶肉细胞，以防止颜色的干扰。 (2)缓水流冲洗目的：防止载玻片上的细胞被冲走。 (3)几种试剂在实验中的作用。 ①0.9%的NaCl溶液(生理盐水)：保持口腔上皮细胞正常形态。 ②8%的盐酸：a.改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；b.使染色质中DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。 *