盒（流式细胞仪法）说明书（版本号1.7）.PDF

CD3-FITC/CD4-PE/CD45-PerCP 荧光单克隆抗体试剂 盒（流式细胞仪法）说明书（版本号：1.7） 【产品名称】CD3-FITC/CD4-PE/CD45-PerCP 荧光单克隆抗体试剂盒（流式细 胞仪法） 【包装规格】50人份/盒 【预期用途】 本产品与流式细胞仪配套使用，用于确定裂解红细胞的全血样本中，下列 人成熟淋巴细胞亚型的百分率和绝对数目：T淋巴细胞（CD3+）和辅助/诱导 T 淋巴细胞（CD3+CD4+）。表达相应抗原的细胞是免疫系统的重要功能细胞，对 该系列抗原进行检定可用于对免疫低下疾病和自身免疫性疾病患者的免疫系统 进行评估，例如 HIV 感染、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、肾脏疾病、荨麻疹、 牛皮癣、湿疹等。 基于细胞的生物学功能和细胞表面表达的抗原，T 淋巴细胞被分为两个亚 群：T辅助/诱导淋巴细胞（CD3+CD4+）、T抑制/杀伤淋巴细胞（CD3+CD8+）， 两者的百分比和绝对数量可用来监控免疫低下和自身免疫疾病。T 辅助/诱导淋 巴细胞是 T淋巴细胞的一个亚细胞群，特征是 CD3+CD4+。本试剂盒可以使 T 辅助/诱导淋巴细胞和 CD3-CD4+的单核细胞区分开来。 相应抗原特性简介： CD3抗体与 CD3/TCR的ε链结合。CD3分子仅存在于 T细胞表面 60-80% 正常人外周血淋巴细胞和 60-70%人胸腺细胞 CD3 阳性。在抗原识别中，CD3 抗原起着信号传递的重要作用。 CD4 分子是一种 55KDⅠ型单链穿膜糖蛋白。CD4 分子主要表达于辅助 T （Th）细胞 ，是 Th细胞 TCR识别抗原的共受体，与组织相容性复合物（MHC） Ⅱ类分子的非多肽区结合，参与 Th细胞 TCR识别抗原的信号传导。同时也是 HIV的受体。35-50%的外周血淋巴细胞、辅助和诱导 T细胞以及 70-80%人胸腺 细胞表达此抗原，该抗原也低密度的表达于人单核细胞表面。 CD45 分子又称为白细胞共同抗原（LCA），识别 180、190、205、220KD 穿膜糖蛋白。CD45抗原大量表达在所有有核的造血细胞表面，如骨髓细胞、胸 腺细胞、淋巴细胞、单核细胞、粒细胞，但成熟红细胞、血小板和非造血组织 细胞不表达此抗原。在淋巴细胞的发育成熟，功能调节及信号传递中具有重要 意义。 【检验原理】 检测样本加入试剂时，试剂中的荧光标记抗体特异性与白细胞表面抗原相 结合，之后使用溶血素处理染色样本，裂解红细胞。在获取过程中，细胞穿过 激光光束并使激光发生散射，同时染色细胞发出荧光。通过这些有仪器检测到 的散射的荧光信号，我们能了解关于细胞的大小、内部复杂程度和相应抗原表 达强度等信息。 【主要组成成分】 CD3-FITC/CD4-PE/CD45-PerCP 特异性 CD3 CD4 CD45 克隆号 UCHT1 OKT4 2D1 免疫球蛋白亚型 IgG1 IgG2b IgG1 种属 小鼠 小鼠 小鼠 荧光染料 FITC PE PerCP λ激发波长 488nm 488nm 488nm 发射峰 519nm 578nm 678nm 溶于 1mL 磷酸盐缓冲液，pH7.2，含 0.2%BSA及 1‰Proclin 300 【其他需要准备的材料】 1. 流式细胞仪用红细胞裂解液； 2. 无菌采血管（EDTA-K 2 3. 量程范围适用于 20μL、100μL、1mL的移液器及一次性吸头； 抗凝）； 4. 12×75mm 流式管； 5. 涡旋振荡器； 6. 流式细胞仪 【储存条件及有效期】 2-8℃避光储存，切忌冷冻。 有效期 12个月，开瓶后不影响产品效期。 运输：泡沫盒内附冰袋运输。 【样本要求】 1. 静脉穿刺全血样本用EDTA-K2 2. 样本要存放于室温且避免震摇，血液采集后 24小时内使用。 抗凝后室温存放，至少采集 200μL全血。 3. 样品染色后避光保存于 2-8°C，需要配合红细胞裂解液使用，裂解样品中 的红细胞，24小时内上机检测。 4. 样本如有微生物污染、脂血、凝血及细胞活力不佳，则应避免使用，除非 样本具有不可替代性，请在结果报告时标注。对于慢性肝病或高脂血症等 患者标本，溶血素无法完全裂解红细胞，可采用密度梯度离心法处理。 5. 本产品用量 20μL/106 【适用机型】 细胞或 20μL/50μL全血。如用于其它方法，请自测最 佳用量。 本品适用于 BD 公司的 BD FACSCanto II?、BD FACSCalibur?、BD FACSAria II?等型号。 【检验方法】 洗涤方案： 1. 在流式管底部加入 20μL CD3/CD4/CD45试剂。 2. 采用反向